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產(chǎn)品名稱：人表皮角化細(xì)胞

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞簡介：

人表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,，由胚胎時(shí)期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層，即基底層,、棘層,、顆粒層、透明層和角質(zhì)層,。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分,，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層,，少數(shù)位于棘細(xì)胞層,。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加,，并喪失分裂活性,。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角化細(xì)胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒   小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒、小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒   小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒,、小鼠超敏C反應(yīng)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠補(bǔ)體片斷試劑盒   小鼠補(bǔ)體片斷試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠補(bǔ)體片斷試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠補(bǔ)體片斷試劑盒,、小鼠補(bǔ)體片斷eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠補(bǔ)體蛋白試劑盒   小鼠補(bǔ)體蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠補(bǔ)體蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠補(bǔ)體蛋白試劑盒、小鼠補(bǔ)體蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble cell differeiation aigen 14 (sCD14) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原14(sCD14)試劑盒

Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit 人酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNP試劑盒人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物精(arginine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次

HumanVitaminD2,，VD2ELISAKit人2(VD2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸化熱休克蛋白90β抗體

一氧化氮合成酶-3（內(nèi)皮型）單克隆抗體

IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原

FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白

CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白

ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原

ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白

IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白

FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein

人表皮角化細(xì)胞大鼠異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)試劑盒 ，英文名： IDH1 ELISA Kit

Mouse leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒

MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumandesmin,DesELISAKit人結(jié)蛋白

細(xì)胞Akt1/PKBa激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20/50/100

ELISAKitNF-κBp65大鼠核因子-κB亞基p65親和肽

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作