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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7349 |
細胞簡介：
人表皮黑色素分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層,，由胚胎時期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,，即基底層、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。黑色素細胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細胞,，起源于神經(jīng)嵴,，后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細胞的異?；蚬δ艿氖Се铝艘幌盗须y治性色素性疾病的發(fā)生，如,、黃褐斑等,。表皮黑色素細胞主要分布于位于表皮的基底層，與表皮細胞共同組成表皮黑素單位,，其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護皮膚免受損害,。
方法簡介：
公司實驗室分離的人表皮黑色素細胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人表皮黑色素經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)試劑盒 96T/48T
Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標志物CA125 試劑盒
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Nogo-Aaibody,NOGO-AAb試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次
HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長激素(US-GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
磷酸化磷脂酰肌醇激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體
氧化蛋白質(zhì)水解酶
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白
酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白
CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein
人表皮黑色素細胞大鼠抑制素B(INHB)試劑盒 ,，英文名： INHB ELISA Kit
Mouse immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒
MouseP-SelectinELISAkit 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanDiphtheriaaibodyELISAKit人白喉抗體
細胞Akt/PKB激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitsmActinin-α大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
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