人鼻黏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：白細(xì)胞介素12p40抗體 FAM133B蛋白抗體 磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯酶抗體 人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠表皮角化上皮細(xì)胞 COR-L95人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：人鼻黏膜成纖維細(xì)胞

組織來源：鼻粘膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人鼻黏膜成纖維分離自鼻黏膜組織,；黏膜是覆蓋在人體內(nèi)消化,、呼吸、泌尿,、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,，有口腔黏膜,、胃腸黏膜、鼻腔黏膜,、氣管黏膜,、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱,。它們的結(jié)構(gòu)也因功能,、部位不一而不盡相同,。鼻腔黏膜，簡(jiǎn)稱鼻黏膜,，覆蓋于鼻腔表面,，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌,。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人鼻黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human nephrin (nephrin) ELISA Kit 人蛋白(nephrin)試劑盒

humahyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanai-nucleosomeaibodyIgG,AnuA-IgG試劑盒人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量試劑盒20次

HumanUbiquitin,UbELISAKit人泛素蛋白(Ub)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸化干擾素α/β受體1抗體

血清學(xué)定義結(jié)腸癌抗原1抗體

HGF重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

干擾素α(IFNα)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha (IFNa)

WARS重組人 WARS / TrpRS 蛋白 Protein

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

干擾素α(IFNα)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha (IFNa)

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

HGF重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

WARS重組人 WARS / TrpRS 蛋白 Protein

人鼻黏膜成纖維細(xì)胞大鼠印度刺猬因子(IHH)試劑盒 ，英文名： IHH ELISA Kit

Mouse immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒

MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 小鼠骨保護(hù)素(OPG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanElastaseELISAKit人彈性蛋白酶

細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量試劑盒20/50次

ELISAKitcAMP大鼠環(huán)0酸腺苷

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作