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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YS-01X6992 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
詳細(xì)介紹
商品屬性：
| 組織來源 | .產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
| 雞卵泡組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X6992 |
細(xì)胞簡介：
雞卵泡顆粒分離自雞卵泡組織,；成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一,，卵泡腔很大,，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層,，與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔,，內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮,，胞核圓形,，細(xì)胞間可見許多毛細(xì)血管，外膜細(xì)胞位于最外層,，多呈梭形,，與周圍結(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞,，在卵泡開始發(fā)育,、卵細(xì)胞成長的同時，周圍的菱形細(xì)胞變?yōu)榱⒎叫?，并由單層增生成?fù)層，因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒,，故稱為顆粒細(xì)胞,。初級卵泡的顆粒細(xì)胞為單層；次級卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層,；成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細(xì)胞的胞核大而圓，著色深,，細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長突起伸入放射帶的凹陷部,。
方法簡介：
實驗室分離的雞卵泡顆粒采用先機(jī)械分離后膠原酶 -聯(lián)合消化法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的雞卵泡顆粒細(xì)經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
傳代特性可傳1代
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| Reprimo蛋白(RPRM)檢測試劑盒 | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 |
| REST輔抑制因子1(RCOR1)檢測試劑盒 | 豬脂肪細(xì)胞 |
| REST輔抑制因子2(RCOR2)檢測試劑盒 | 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 |
| REST輔抑制因子3(RCOR3)檢測試劑盒 | 兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 |
| RET原癌基因(RET)檢測試劑盒 | 雞肺動脈平滑肌細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測試劑盒 | 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白2(RSPO2)檢測試劑盒 | 小鼠氣管上皮細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白3(RSPO3)檢測試劑盒 | 豬前脂肪細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白4(RSPO4)檢測試劑盒 | 大鼠氣管上皮細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白(S100)檢測試劑盒 | 兔晶狀體上皮細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)檢測試劑盒 | 雞胚成纖維細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)檢測試劑盒 | 人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13)檢測試劑盒 | 小鼠氣管平滑肌細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A14(S100A14)檢測試劑盒 | 豬內(nèi)皮細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2)檢測試劑盒 | 大鼠氣管平滑肌細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A5(S100A5)檢測試劑盒 | 兔肌腱干細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)檢測試劑盒 | 雞前脂肪細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)檢測試劑盒 | 雞卵泡顆粒細(xì)胞人肺動脈成纖維細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測試劑盒 | 小鼠肺成纖維細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測試劑盒 | 豬成骨細(xì)胞 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
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