詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:PCR熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機,、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL,、200 µL,、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL、200 µL,、1000 µL),、滅菌雙蒸水。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1,、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2,、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
具有下列特點:
1.根據(jù) 指標的保守序列設(shè)計的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng),。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達到幾百拷貝/反應(yīng),。
3.即開即用,,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,,定量準確快速,。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染,。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR,。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,,若為長期冷凍組織,,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,,影響PCR效率,。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀,。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,,混勻后再使用,。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer,。否則,,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,影響實驗結(jié)果,。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi),,以便擴增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作,。
Recombinant Human PSMA7/HSPC protein原裝、分裝He-LWamide II
FGF8 antibody原裝,、分裝激頭肽
CD160 antibody [BY55]原裝,、分裝激頭肽(7-11)
Goat Rat IgG H&L (10nm Gold)原裝、分裝Helodormin
TSPAN10 antibody原裝,、分裝毒蜥肽Ⅰ
VPS4B/MIG1 antibody原裝,、分裝毒蜥肽Ⅱ
SMYD5 antibody原裝、分裝血凝素(48-68)/流感病毒
GALNT13 antibody原裝,、分裝血紅蛋白(64-76)
Porimin antibody原裝,、分裝血紅素激肽1,人CD34 antibody [EP373Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺,,雞,普通火雞
RSK4 (phospho S232) antibody [EP1524Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺,,人,牛,,荷蘭豬,,大鼠,小鼠
RSK4 (phospho S232) antibody [EP1524Y]原裝、分裝胰高血糖素樣肽-1(9-36)酰胺,,人,,牛,荷蘭豬,,大鼠,,,豬,,小鼠
RSK4 (phospho S232) antibody [EP1524Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-2(1-34),人
KIAA1958 antibody原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-2(1-33),,人
ATM (phospho S1981) antibody [EP1890Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-2,,大鼠
ATM (phospho S1981) antibody [EP1890Y]原裝、分裝胰高血糖素(1-29),,牛,,人,豬
ATM (phospho S1981) antibody [EP1890Y]原裝,、分裝胰高血糖素(1-37),,豬;胃泌調(diào)節(jié)素,,豬
FAK (phospho Y861) antibody [EP841Y]原裝,、分裝胰高血糖素(19-29),牛,,人,,豬
PCR熒光定量檢測試劑盒肌養(yǎng)蛋白檢測試盒20mg
肌抑素檢測試盒20mg
肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶檢測試盒10mg
基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白檢測試盒20mg
基質(zhì)γ羧基谷氨蛋白檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶1檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶10檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶12檢測試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶13檢測試盒20mg
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。