化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：小鼠氣管成纖維細(xì)胞
組織來源：氣管
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
小鼠氣管成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介：
小鼠氣管成纖維分離自氣管組織,；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分,；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,，與環(huán)狀軟骨相連,；向下至第四,、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左,、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈,。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性,，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,，以凈化吸入的氣體,。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。氣管成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織,。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒 小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒 小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒,，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒,、小鼠琥珀酸脫氫酶eisa試劑盒
大鼠Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒 大鼠Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒 大鼠Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒,，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：大鼠Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒、大鼠Ⅷ相關(guān)抗原eisa試劑盒
大鼠抗復(fù)合物試劑盒 大鼠抗復(fù)合物試劑盒 大鼠抗復(fù)合物試劑盒,，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：大鼠抗復(fù)合物試劑盒,、大鼠抗復(fù)合物eisa試劑盒
大鼠型纖溶酶原激活物受體試劑盒 大鼠型纖溶酶原激活物受體試劑盒 大鼠型纖溶酶原激活物受體試劑盒，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠型纖溶酶原激活物受體試劑盒,、大鼠型纖溶酶原激活物受體eisa試劑盒
磷酸化MLKL單克隆抗體
性激素結(jié)合球蛋白抗體
SERPINE1重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CRP (C-reactive protin 0.5mgCRP (C-reactive protin) C-反應(yīng)蛋白(抗原)
IGFBP7重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 Protein
DKKL1 Protein Human 重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SERPINA7 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白
CRP (C-reactive protin 0.5mgCRP (C-reactive protin) C-反應(yīng)蛋白(抗原)
DKKL1 Protein Human 重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SERPINE1重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
SERPINA7 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白
IGFBP7重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 Protein
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒
Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)pcr檢測試劑盒分裝
Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物氨含量熒光定量試劑盒20次
Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠氣管成纖維細(xì)胞大鼠原激活蛋白激酶10(MAPK10)試劑盒 ,，英文名： MAPK10 ELISA Kit
Mouse omein ELISA Kit (omein) 小鼠網(wǎng)膜素(omein)試劑盒
Ratesogen,EELISAKit 大鼠雌激素(E)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHGV-IgM(HumanHepatitisGvirusIgG)ELISAKit人庚型肝病毒IgM
細(xì)胞SGK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPCⅠ大鼠Ⅰ型前膠原
化工儀器網(wǎng)