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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
氣管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8525 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠氣管軟骨分離自氣管組織,；氣管（Trachea）,，呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣,，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四,、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左,、右主支氣管,，分叉處稱(chēng)為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,，有彈性,，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開(kāi)狀態(tài),。軟骨由軟骨細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)組成,。軟骨內(nèi)的基質(zhì)呈凝膠狀態(tài)，具有較大韌性,。軟骨是以支持作用為主的結(jié)締組織,。軟骨內(nèi)不含血管和淋巴管，營(yíng)養(yǎng)物由軟骨膜內(nèi)的血管中滲透到細(xì)胞間質(zhì)中,，再營(yíng)養(yǎng)骨細(xì)胞,。根據(jù)細(xì)胞間質(zhì)的不同可把軟骨分為3種，即透明軟骨,、彈性軟骨和纖維軟骨,。透明軟骨的基質(zhì)是由膠原纖維、原纖維和周?chē)鸁o(wú)定形的基質(zhì)組成,。在胚胎時(shí)期有臨時(shí)支架作用,，后來(lái)這種作用被骨代替,。成人的透明軟骨主要分布在氣管和支氣管壁中、肋骨的胸骨端和骨的表面（關(guān)節(jié)軟骨）,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管軟骨采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
小鼠氣管軟骨體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1 英文名稱(chēng)： Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1 英文縮寫(xiě)： LOX-1
兔脂氧合酶同工酶 英文名稱(chēng)： Rabbit Lipoxygenase Isozymes 英文縮寫(xiě)： LOXI
兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1 英文名稱(chēng)： Rabbit Maix Metalloproteinase 1 英文縮寫(xiě)： MMP-1
兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2 英文名稱(chēng)： Rabbit Maix Metalloproteinase 2 英文縮寫(xiě)： MMP-2
肝腸鈣粘連蛋白重組兔單克隆抗體
生物鐘KAT13D蛋白抗體
CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)
FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein
H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白
PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白
CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)
H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白
CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白
FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein
小鼠αN已?；咸擒彰?span>(αNAG)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒
Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盤(pán)催乳素(HPL)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HumanChromogranin,CgA試劑盒人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
總脂肪酶(lipase)定量試劑盒50次
Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠氣管軟骨細(xì)胞大鼠組蛋白H2A(H2A)試劑盒 ，英文名： H2A ELISA Kit
Mouse ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)試劑盒
MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen2,LFA-2ELISAKit人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2
土壤元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20次
ELISAKitdsDNA大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體
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