豬心臟微血管周細胞

商品屬性：

細胞簡介：

豬心臟微血管周分離自心臟組織,；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力,，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,，左心房,、左心室、右心房,、右心室四個腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣）,，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流,。心臟的作用是推動血液流動，向器官,、組織提供充足的血流量,，以供應氧和各種營養(yǎng)物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳,、無機鹽,、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能,。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,，心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血 - 再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用,。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；

　　2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,，應將原代細胞換液；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二,、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗；

　　4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。

方法簡介：

實驗室分離的豬心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的豬心臟微血管周經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基,，含FBS、EGF,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右,；3代以內狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

豬心臟微血管周體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。

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