詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
神經(jīng) | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 雙極,、多極形 | YS-01X8559 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
豬雪旺氏細(xì)胞分離神經(jīng)組織,;周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞稱施萬(wàn)(schwann,,又名雪旺細(xì)胞)細(xì)胞,,它沿神經(jīng)元的突起分布,。施萬(wàn)細(xì)胞包裹在神經(jīng)纖維上,,這種神經(jīng)纖維叫有髓神經(jīng)纖維,。有髓神經(jīng)纖維和無(wú)髓神經(jīng)纖維的施萬(wàn)細(xì)胞的形態(tài)和功能有所差異,施萬(wàn)細(xì)胞的外表面有基膜,,能分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,,促進(jìn)受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生,參與周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構(gòu)成。施萬(wàn)細(xì)胞的胞核呈長(zhǎng)卵圓形,,其長(zhǎng)軸與軸突平行,,核周有少量胞質(zhì)。由于施萬(wàn)細(xì)胞包在軸突的外面,,故又稱神經(jīng)膜細(xì)胞(neurilemmalcell),,它的外面包有一層基膜。施萬(wàn)細(xì)胞外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經(jīng)膜(neurilemma),,光鏡下可見(jiàn)此膜,。在有髓神經(jīng)纖維發(fā)生中,伴隨軸突一起生長(zhǎng)的施萬(wàn)細(xì)胞表面凹陷成一縱溝,,軸突位于縱溝內(nèi),,溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜(mesaxon)。軸突系膜不斷伸長(zhǎng)并反復(fù)包卷軸突,,把胞質(zhì)擠至細(xì)胞的內(nèi),、外邊緣及兩端(即靠近郎氏結(jié)處),從而形成許多同心圓的螺旋膜板層,,即為髓鞘,。故髓鞘乃成自施萬(wàn)細(xì)胞的胞膜,屬施萬(wàn)細(xì)胞的一部分,。施萬(wàn)細(xì)胞的胞質(zhì)除見(jiàn)于細(xì)胞的外,、內(nèi)邊緣和兩端外,還見(jiàn)于髓鞘板層內(nèi)的施-蘭切跡,。該切跡構(gòu)成螺旋形的胞質(zhì)通道,,并與細(xì)胞外、內(nèi)邊緣的胞質(zhì)相通,。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的豬雪旺氏采用 - 膠原酶混合消化法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的豬雪旺氏經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、bFGF,、Insulin,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):雙極、多極形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
豬雪旺氏體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒
兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒
兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體
單體橙紅色熒光蛋白單克隆抗體
ART4重組大鼠 ART4 蛋白 Protein
ECP(eosinophil cationic protein 0.5mgECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原
ARG1重組人 ARG1 / Arginase 1 蛋白 Protein
GPR37 Protein Human 重組人 GPR37 蛋白
LIFR Protein Mouse 重組小鼠 LIFR / CD118 蛋白
ECP(eosinophil cationic protein 0.5mgECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原
GPR37 Protein Human 重組人 GPR37 蛋白
ART4重組大鼠 ART4 蛋白 Protein
LIFR Protein Mouse 重組小鼠 LIFR / CD118 蛋白
ARG1重組人 ARG1 / Arginase 1 蛋白 Protein
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)試劑盒
Humanoxytocin,OTELISAKit 人催產(chǎn)素(OT)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8試劑盒人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)試劑盒規(guī)格:96T/48T
滋養(yǎng)細(xì)胞法胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10次
Humansecretieceptor,SRELISAKit人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬雪旺氏細(xì)胞大鼠色胺酸羥化酶2(TPH2)試劑盒 ,,英文名: TPH2 ELISA Kit
Mouse aial naiuretic peptide (ANP) ELISA Kit 小鼠心肽(ANP)試劑盒
RatBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHABP(MouseHya]uronatebindingprotein)ELISAKit小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白
細(xì)胞半胱蛋白酶-6(CASPASE-6)活性熒光定量試劑盒20次
RatvisfatinELISAKit大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行