小鼠腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;RKO-LUC-EGFP 組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶GCN5抗體 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 大鼠外周血淋巴細(xì)胞 KB抑制蛋白激酶Ζ抗體 人腎小管上皮細(xì)胞 伴肌動(dòng)蛋白抗體

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產(chǎn)品名稱：小鼠腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：腎

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS,、EGF,、bFGF、IGF,、VEGF,、Heparin、Hydrocortisone,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

小鼠腎臟微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

細(xì)胞簡介：

小鼠腎臟微血管內(nèi)皮分離自腎臟；腎臟是小鼠的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎臟內(nèi)部的結(jié)構(gòu)，可分為腎實(shí)質(zhì)和腎盂兩部分,。在腎縱切面可以看到,，腎實(shí)質(zhì)分內(nèi)外兩層：外層為皮質(zhì)，內(nèi)層為髓質(zhì),。腎皮質(zhì)位于腎實(shí)質(zhì)表層,，富含血管，新鮮時(shí)呈紅褐色,，由一百多萬個(gè)腎單位組成,。每個(gè)腎單位由腎小體和腎小管所構(gòu)成，部分皮質(zhì)伸展至髓質(zhì)錐體間,，成為腎柱,。腎髓質(zhì)位于腎皮質(zhì)的深面，血管較少,，色淡紅,，為10-20個(gè)錐體所構(gòu)成。腎錐體在切面上呈三角形,。錐體底部向腎凸面,，向腎門，錐體主要組織為集合管，錐體稱腎乳頭,，每一個(gè)乳頭有10-20個(gè)乳頭管,，向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內(nèi)有腎小盞,，為漏斗形的膜狀小管,，圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接,。每腎有7-8個(gè)腎小盞,，相鄰2-3個(gè)腎小盞合成一個(gè)腎大盞。每腎有2-3個(gè)腎大盞,，腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂,。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細(xì)，移行為輸尿管,。腎單位是腎臟結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內(nèi)有一個(gè)毛細(xì)血管團(tuán),，稱為腎小球,，腎小球是個(gè)血管球。它由腎動(dòng)脈分支形成,。腎小球外有腎小囊包繞,。腎小囊分兩層，兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通,。腎小管匯成集合管,。若干集合管匯合成乳頭管，尿液由此流入腎小盞,。微血管又稱毛細(xì)血管,。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間,。平均直徑7-9微米,，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布,。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,，厚約0.5微米?；ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織,，其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等,。細(xì)的毛細(xì)血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,，較粗的毛細(xì)血管由2-3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成,。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細(xì)血管,，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃）,，稱連續(xù)毛細(xì)血管；分布于內(nèi)分泌腺,、腎臟等處的毛細(xì)血管,，除有縫隙連接外,，細(xì)胞本身有許多小孔,，（孔徑800-1000埃），稱有孔毛細(xì)血管,；分布于肝,、脾、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細(xì)血管,，管腔擴(kuò)大,，稱血竇。毛細(xì)血管的管壁薄,、通透性大,、管徑細(xì)（8-10微米）、數(shù)量多,、血流速度慢,，這些特點(diǎn)使其成為血液與組織液進(jìn)行物質(zhì)交換的場所，又稱交換血管,。血竇（sinusoid）由毛細(xì)血管管腔擴(kuò)大而成,，竇壁的一般結(jié)構(gòu)與毛細(xì)血管壁相同，由單層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,，內(nèi)皮細(xì)胞膜上有窗孔,。不同器官的竇壁結(jié)構(gòu)各有差別。脾血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間有較寬裂隙,；肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞是不連續(xù)的,，有較寬的細(xì)胞隙（0.1-0.5微米）；肝,、脾血竇的基膜不完整或無基膜,，通透性比毛細(xì)血管大，較大的蛋白質(zhì)和血細(xì)胞可以通過,。肝血竇壁內(nèi)有枯否細(xì)胞,，脾血竇內(nèi)外有巨噬細(xì)胞，這兩種細(xì)胞都有吞噬能力,，可吞噬清除血液中的異物,、細(xì)菌等有害物質(zhì)，是機(jī)體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成分。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜,。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化,，結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細(xì)胞如何處理？

1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠補(bǔ)體成分5   英文名稱：   Mouse Compleme Compone 5   英文縮寫：   C5

小鼠結(jié)締組織生長因子   英文名稱：   Mouse Connective Tissue Growth Factor   英文縮寫：   CTGF

小鼠皮質(zhì)   英文名稱：   Mouse Coicosterone   英文縮寫：   CO

小鼠肌酐   英文名稱：   Mouse Creatinine   英文縮寫：   CT

PE-Cy5標(biāo)記人CD62E/CD62P單克隆抗體

環(huán)指蛋白207抗體

CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原

IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BC僀?僀

DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原

ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒

Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重組激活基因1(RAG-1)pcr檢測試劑盒分裝

Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次

HumanVitaminB6,，VB6ELISAKit人B6(VB6)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)試劑盒 ，英文名： FoxP3 ELISA Kit

Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒

ELISA 小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF) 分裝

CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脫氫酶

通用型N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量試劑盒20次

ELISAKitIFN-γ猴γ干擾素