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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
胎盤(pán) | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X8530 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠胎盤(pán)絨毛膜分離自胎盤(pán)組織；胎盤(pán)（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官,，由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤(pán)從母體取得營(yíng)養(yǎng),，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤(pán)還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類(lèi)和魚(yú)類(lèi)也以胎生方式繁殖后代,，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,，這樣的結(jié)構(gòu)稱(chēng)假胎盤(pán)。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成,。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,，外裹合體滋養(yǎng)層,，稱(chēng)初級(jí)干絨毛,。胚外中胚層長(zhǎng)入初級(jí)干絨毛的中軸，使初級(jí)干絨毛變成了次級(jí)干絨毛,。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,，并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí)，次級(jí)干絨毛改稱(chēng)三級(jí)干絨毛,。三級(jí)干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼,。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤(pán),，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤(pán)絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤(pán)絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
小鼠胎盤(pán)絨毛膜體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
木聚糖酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
酸性木聚糖酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
堿性木聚糖酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
β-木糖苷酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
CD71單克隆抗體
甘油激酶抗體
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標(biāo)簽
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標(biāo)簽
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
豬雌激素(E)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit 豬促胃液素受體(GsaR)試劑盒分裝
CLIAKitforALP-B(MouseBone-specificAlkphaseB)ELISAKit小鼠骨特異性堿性0酸酶B
血液0酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續(xù)循環(huán)定0比色法定量試劑盒20次
Mouseα-Glucosidase,a-GluELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒
小鼠胎盤(pán)絨毛膜細(xì)胞小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒
Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒
Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)試劑盒分裝
HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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