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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：小鼠退行性椎間盤髓核細(xì)胞
組織來源：椎間盤
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS、EGF,、Transferrin,、Selenium Solution、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
小鼠退行性椎間盤髓核體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠退行性椎間盤髓核分離退行性椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,，分為中央部的髓核,，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán),，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列,。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,，下面骺環(huán)中間的骨面,。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,，位于髓核的四周,。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷,。髓核,，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性,，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì),。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%,，即使到了老年，其含水量也在70%上下,。髓核在出生時(shí)體積大而松散,，位于椎間盤的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤的中后部,；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體,、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長(zhǎng),，髓核中的蛋白多糖解聚增多,，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠退行性椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠退行性椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
胃泌素 英文名稱： Gasin 英文縮寫： G
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3 英文名稱： cardiac muscle anscription factor GATA3 英文縮寫： GATA3
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 英文名稱： cardiac muscle anscription factor GATA4 英文縮寫： GATA4
粒細(xì)胞趨化蛋白-2 英文名稱： neuophilicgranulocyte chemokines Protein 2 英文縮寫： GCP-2
微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體
E3泛素蛋白連接酶亞基KPC2抗體
NCAM1重組大鼠 NCAM1 / CD56 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原 0.5mgCyclin E 周期素E/原癌基因抗原
MYOC重組人 MYOC / Myocilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICAM1 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原 0.5mgCyclin E 周期素E/原癌基因抗原
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NCAM1重組大鼠 NCAM1 / CD56 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ICAM1 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MYOC重組人 MYOC / Myocilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA 試劑盒
Rat urokinase (UK) ELISA Kit 大鼠(UK)試劑盒
HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)試劑盒分裝
HumanAspaateaminoansferase,GOT/GPT試劑盒人天門冬轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)試劑盒
植物源性食品山核桃(pecan)試劑盒20次
Humahymidinephosphorylase,TPELISAKit人核苷0酸化酶(TP)試劑盒
小鼠退行性椎間盤髓核細(xì)胞大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2(SOCS2)試劑盒 ，英文名： SOCS2 ELISA Kit
Mouse epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 小鼠上皮粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒
MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒分裝
HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(捕獲法一步法)
細(xì)胞IRAK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitLTB4大鼠白三烯B4
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