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產(chǎn)品名稱：小鼠胚成纖維細胞

組織來源：胚胎

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

小鼠胚成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞簡介：

小鼠胚成纖維分離自胚胎,；成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。該細胞常用作ES細胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細胞,，能產(chǎn)生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,，且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,，而且可以為ES細胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用,。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠胚成纖維采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的小鼠胚成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

血小板衍化生長因子-AB   英文名稱：   plateler-derived growth factor AB   英文縮寫：   PDGF-AB

血小板衍化生長因子-BB   英文名稱：   plateler-derived growth factor BB   英文縮寫：   PDGF-BB

程序性死亡因子1   英文名稱：   programmed death 1   英文縮寫：   PD1

旁分泌的方式分泌血小板源性生長因子受體β   英文名稱：   Platelet-derived growth factor receptor beta   英文縮寫：   PDGF Rβ

5-三磷酸肌醇受體2抗體

ZIM3蛋白抗體

CD14重組大鼠 CD14 蛋白 Protein

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)

HNMT重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標簽) Protein

CCDC134 Protein Human 重組人 CCDC134 蛋白

CLEC6A Protein Mouse 重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)

CCDC134 Protein Human 重組人 CCDC134 蛋白

CD14重組大鼠 CD14 蛋白 Protein

CLEC6A Protein Mouse 重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白

HNMT重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA pcr檢測試劑盒

Human ai parietal cell aibody (AGPA/PCA) ELISA Kit 人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)試劑盒

HumanProteoglycan,PGELISAKit 人蛋白聚糖(PG)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforACA-IgGELISAKit大鼠抗心0脂抗體IgG

耶爾森氏菌屬(Yersinia)鑒定16SrDNAPCR擴增試劑盒20次

MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit小鼠骨保護素配體(OPGL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠胚成纖維細胞大鼠蛋酸酶(PP)試劑盒 ,，英文名： PP ELISA Kit

Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒

病毒通用型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLptn/LTN/XCL1(Humanlymphotactin)ELISAKit人淋巴細胞趨化因子

通用免疫化學(xué)封閉溶液100毫升

ELISAKitMYO/MB雞肌紅蛋白

收到細胞如何處理？

1,、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作