小鼠陰道上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：鋅指蛋白768抗體 RAN結(jié)合蛋白6抗體 HCC827 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 Panc 05.04人胰腺癌上皮細(xì)胞 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 CNE-2Z (人鼻咽癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系) 小鼠牙髓干細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱：小鼠陰道上皮細(xì)胞

組織來源：陰道

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS,、EGF、Hydrocortisone,、腎上腺素,、甲狀腺素、Insulin,、Transferrin,、Selenium Solution、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

小鼠陰道上皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞僀?僀

細(xì)胞簡介：

小鼠陰道上皮分離自陰道組織,；陰道位于膀胱,、尿道和直腸之間，是一個(gè)富有彈性的管狀器官,。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血,、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,，也是一個(gè)重要的性交器官,。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層，即黏膜層,、肌層和外膜,，陰道黏膜是外層，也就是淺表的那一層,，相當(dāng)于皮膚的外面層一樣,。陰道上皮呈粉紅色，表面為復(fù)層鱗狀上皮,，但無角化層,。在正常的月經(jīng)周期中，陰道上皮脫落的上皮細(xì)胞的形態(tài)隨著卵巢內(nèi)分泌的變化而改變,，因此通過陰道脫落上皮的病理檢查便可以初步判斷卵巢的內(nèi)分泌功能狀況,。陰道粘膜是指陰道內(nèi)壁分泌的保持陰道內(nèi)壁表面濕潤，保持表面活力的粘液膜層,，因?yàn)槠浔砻娑嗾吵?，故為粘膜。在卵泡期,，陰道粘膜受雌激素作用,，上皮增厚，表皮?xì)胞角化,；陰道上皮細(xì)胞內(nèi)糖原豐富（注：陰道粘膜上皮是復(fù)層扁平上皮又名“復(fù)層鱗狀上皮"）,，在陰道桿菌作用下分解為乳酸，保持陰道的酸性環(huán)境,；排卵后,，受孕激素作用，陰道粘膜上皮大量脫落,，角化現(xiàn)象消失,。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道上皮采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠角化細(xì)胞生長因子（KGF）試劑盒

小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒

小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒

小鼠膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒

DISC1 C端抗體

干擾素α8抗體

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

TNFRSF14 Prote僀?僀

DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

TNFRSF14 Protein Mouse 重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)pcr檢測試劑盒

Human prealbumin (PA) ELISA Kit 人前白蛋白(PA)試劑盒

Humanmyosinheavychain,MHCELISAKit 人肌球蛋白重鏈(MHC)pcr檢測試劑盒分裝

Humanadeno-associatedvirus,AAV試劑盒人腺相關(guān)病毒(AAV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

直腸標(biāo)記K-ras糞便檢測突變巢式分析試劑盒50次

Mousealpha-L-fucosidase,AFUELISAKit小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠陰道上皮細(xì)胞大鼠葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒 ，英文名： GPI ELISA Kit

Mouse plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒

Ratai-IVIgGaibodyELISAKit 大鼠抗IVIgG抗體pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGP-II(HumanGlycogenphosphorylaseII)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II

細(xì)胞蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作