詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
椎間盤 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X8547 |
細胞簡介:
小鼠終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織;椎體終板是椎體在生長發(fā)育過程中,,椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,,呈輕度凹陷,即為骨性終板,。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋,,并終生存在,即為軟骨終板,,上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構(gòu)成椎間盤,。椎體終板構(gòu)成了椎間盤的上下邊界,位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間,。是由軟骨下骨和厚度相當?shù)母采w其上的軟骨組成,。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體,同時具有平衡分散應(yīng)力的作用,。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),,這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,,稱為同源細胞群。電鏡下,,終板軟骨細胞有突起和皺褶,,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,,終板軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠終板軟骨采用膠原酶 - 聯(lián)合消化并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠終板軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS,、EGF,、Insulin、Transferrin,、Selenium Solution,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
小鼠終板軟骨體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 組裝/原裝
豬白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 組裝/原裝
豬白介素6(IL-6)試劑盒 組裝/原裝
豬白介素4(IL-4)試劑盒 組裝/原裝
FA20A抗體
絲/蘇蛋白激酶5抗體
LTBR重組大鼠 LTBR / TNFRSF3 蛋白 Protein
Dnmt3a(cytosine-5 0.5mgDnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A) DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α(抗原)
SERPINB9重組人 SerpinB9 / CAP-3 蛋白 (His 標簽) Protein
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白
GFRA2 Protein Mouse 重組小鼠 GFRA2僀?僀
Dnmt3a(cytosine-5 0.5mgDnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A) DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α(抗原)
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白
LTBR重組大鼠 LTBR / TNFRSF3 蛋白 Protein
GFRA2 Protein Mouse 重組小鼠 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 標簽)
SERPINB9重組人 SerpinB9 / CAP-3 蛋白 (His 標簽) Protein
豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒
Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒
PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒分裝
CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽
血液精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)試劑盒
小鼠終板軟骨細胞大鼠饑餓素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)試劑盒 ,,英文名: GHRL ELISA Kit
Rat 17- Ketosteroid (17-KS) ELISA Kit 大鼠17-酮類固醇(17-KS)試劑盒
RatCollagenaseTypeIIELISAKit 大鼠膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒分裝
CLIAKitforET(Mouseendotoxin)ELISAKit小鼠內(nèi)毒素
細胞亮氨基肽酶活性染色試劑盒50次
RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit大鼠癌標志物-CA153試劑盒