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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
羊膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8542 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠羊膜間充質(zhì)干分離自胎盤羊膜組織,；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,，由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性,。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,，含有眼表上皮細(xì)胞,，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì)，其光滑,，無(wú)血管,、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性,；在電鏡下,，其分為五層：上皮層、基底膜,、致密層,、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,，主要為Ⅰ,、Ⅲ、Ⅳ,、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,，且還有合成,、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠羊膜間充質(zhì)采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠羊膜間充質(zhì)經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
小鼠羊膜間充質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔干細(xì)胞因子(rabbit SCF) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-a(rabbit TGF-a) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(rabbit TGF-b1) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-b2(rabbit TGF-b2) 作用： ELISA 試劑盒 組裝/原裝
CD339抗體
大腦蛋白2抗體
SMAD5重組小鼠 Smad5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
干擾素α4(IFNα4)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha 4 (IFNa4)
GPD1重組人 GPD1 / Glycerolphosphate Dehydrogenase 1 蛋白 Protein
HSPD1 Protein Human 重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FCGR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD16 / FCG僀?僀
Dermokine蛋白(DMKN)重組蛋白 Recombinant Dermokine (DMKN)
HSPD1 Protein Human 重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
HDAC8重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白 Protein
CD86 Protein Rat 重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白
IL27重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 Protein
小鼠B因子(BF)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat peosidine ELISA Kit (Peosidine) 大鼠戊糖素(Peosidine)試劑盒
HumanFollistatin,FSELISAKit 人卵泡抑素(FS)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HumanCompleme3,C3試劑盒人補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織a-(a-AMYLASE)活性比色法定量試劑盒20次
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinC,SP-CELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠單酰(malonyl CoA)試劑盒 ，英文名： malonyl CoA ELISA Kit
Mouse alpha galactosyl aibody (Gal) ELISA Kit 小鼠α半乳糖基抗體(Gal)試劑盒
ELISA 小鼠(mouse EPI) 分裝
CLIAKitforKLK1(HumanKallikrein1)ELISAKit人1
通用型大腸桿菌(Escherichiacoli)試劑盒20次
ELISAKitTFR/CD71大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體
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