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基因PCR測定試劑盒

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  • 型號 50T
  • 品牌 其他品牌
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更新時間:2024-09-11 16:46:39瀏覽次數(shù):1500

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 YS31644-R 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
基因PCR測定試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,,一定要注意不要污染其他試劑和成分,。在專門的區(qū)域操作,。

詳細(xì)介紹

基因PCR測定試劑盒特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。



?原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

 

適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴增曲線或Ct值≤35,。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,,線形為直線或輕微斜線,,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期,。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi),。此時應(yīng)對標(biāo)本進行重復(fù)檢測,,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,,則判定為陽性,否則為陰性,。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值,。

PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板,;(2)引物與模板退火,;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴增,。
其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補鏈,。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

CD44 antibody [MEM-263] (Allophycocyanin)原裝、分裝血紅素激肽1,,大鼠,小鼠

Human Serum Albumin antibody [AL-01] (Biotin)原裝,、分裝血啡肽-7

CD81 antibody [M38] (Phycoerythrin)原裝,、分裝型肝炎病毒受體結(jié)合片段

EGFR (phospho Y992) antibody [EM-12]原裝,、分裝型肝炎病毒C 非結(jié)構(gòu)蛋白3 蛋白酶抑制1

FAU / 40S ribosomal protein S30 antibody原裝、分裝型肝炎病毒前導(dǎo)S區(qū)(120-145)

Fibromodulin antibody原裝,、分裝人類表皮生長子受體-2/神經(jīng)膜(654-662)GP2

Ferritin Heavy Chain antibody原裝、分裝人類表皮生長子受體-2/神經(jīng)膜(869-877)

GCLM antibody原裝,、分裝孢疹病毒抑制1

CD105 antibody [MJ7/18]原裝,、分裝6組氨FAK (phospho Y861) antibody [EP841Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-1酰胺,人

FAK (phospho Y861) antibody [EP841Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽-1(7-17)-Cys

MSK1 (phospho S360) antibody [EP1888Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽Ⅰ(7-36)酰胺,,人

MSK1 (phospho S360) antibody [EP1888Y]原裝,、分裝胰高血糖素樣肽1(7-37)

MSK1 (phospho S360) antibody [EP1888Y]原裝,、分裝谷蛋白外啡肽A5

MARCKS (phospho S158) antibody [EP2113Y]原裝、分裝谷蛋白外啡肽B5

MARCKS (phospho S158) antibody [EP2113Y]原裝,、分裝谷蛋白外啡肽C

MARCKS (phospho S158) antibody [EP2113Y]原裝,、分裝糖原合成酶導(dǎo)出肽

Dopamine Receptor D1 antibody [EP1560Y]原裝,、分裝糖蛋白激素a(32-46)酰胺
基因PCR測定試劑盒肌聯(lián)蛋白檢測試盒20mg

肌強直蛋白蛋白激酶檢測試盒10mg

肌球蛋白檢測試盒20mg

肌球蛋白輕鏈激酶檢測試盒20mg

肌肉骨骼受體酪氨激酶抗體檢測試盒20mg

肌激酶同工酶BB檢測試盒20mg

肌激酶同工酶MB檢測試盒20mg

肌激酶同工酶MM檢測試盒20mg

肌細(xì)胞生成素檢測試盒20mg

實驗過程:
一,、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測
三,、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行,。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響,。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,,純化的方法越簡單越好,。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應(yīng)戴手套。

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