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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人骨骼肌成纖維細(xì)胞
組織來源：骨骼肌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、bFGF,、Insulin,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
人骨骼肌成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
人骨骼肌成纖維分離自四肢肌肉組織,；骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種，約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官,，有豐富的血管,、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng),。肌肉可根據(jù)共形狀、大小,、位置,、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌、三角肌,、梨狀肌等,。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多,，且都位于細(xì)胞膜下方,。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）,。明帶染色較淺,，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線,。H線的中部有一M線,。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線,。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段,，叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,，細(xì)胞呈纖維狀,，不分支，有明顯橫紋,，核很多,，且都位于細(xì)胞膜下方，細(xì)胞多呈梭行,，具有一定的方向性,。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人骨骼肌成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的人骨骼肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
山羊腦啡肽（ENK）試劑盒 96T/48T
山羊內(nèi)啡肽（EP）試劑盒 96T/48T
山羊骨形成蛋白2（BMP-2）試劑盒 組裝/原裝
山羊孤啡肽（OFQ/N）試劑盒 96T/48T
豚鼠神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒 ,，英文名： NGF ELISA Kit
Human complex edprostate specific aigen (CPSA) ELISA Kit 人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)試劑盒
rabbitSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBAX(HumanBcl-2associatedXprotein)ELISAKit人Bcl-2相關(guān)X蛋白
線蟲M9緩沖液500毫升
rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
G蛋白α抑制蛋白2抗體
神經(jīng)叢蛋白B3抗體
CD48重組小鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 Protein
Caspase-8 (pro Mch5 0.5mgCaspase-8 (pro Mch5) 半胱蛋白酶8抗原
ENTPD3重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白 Protein
IL16 Protein Human 重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白
CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白
Caspase-8 (pro Mch5 0.5mgCaspase-8 (pro Mch5) 半胱蛋白酶8抗原
IL16 Protein Human 重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白
CD48重組小鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 Protein
CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白
ENTPD3重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白 Protein
人骨骼肌成纖維細(xì)胞大鼠白介素17(IL-17)試劑盒 ,，英文名： IL-17 ELISA Kit
Mice malondialdehyde (MDA) ELISA Kit 小鼠二(MDA)試劑盒
ELISA 小鼠胰島素(mouse Insulin) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-2sRAlpha/CD25(Humansolubleierleukin-2receptor)ELISAkit人白介素2可溶性受體α鏈
通用型基因甲基化試劑盒20/50次
ELISAKitOxLDL大鼠氧化低密度脂蛋白
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