詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
筋膜 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8297 |
細胞簡介:
人筋膜成纖維分離自筋膜組織;筋膜,,解剖結構名,。指肌肉的堅韌部分。附于骨節(jié)者為筋,,包于肌腱外者為膜,。是聯(lián)絡關節(jié)、肌肉,,主 司運動的組織,。為肝所主,并賴肝血的滋養(yǎng),。筋膜是一類結締組織,,結締組織除了筋膜還有其他表現(xiàn)的形式,如腱,、韌帶,、腱膜和疤痕組織。在不同的地方結締組織也有著不同的名稱:腦和脊髓周圍的是腦膜,;骨周圍是骨膜,;心臟周圍是心包;腹腔內(nèi)表面的是腹膜;在皮下層包圍整個身體和封閉肌肉和肌群的叫筋膜,。筋膜位于肌肉的表面,,分為淺筋膜和深筋膜兩種。(1)淺筋膜位于皮下,,又稱皮下筋膜,,由疏 松結締組織構成,其內(nèi)含有脂肪,、淺靜脈,、皮神經(jīng)以及淺淋巴結和淋巴管等。脂肪的多少因身體部位,、性別和營養(yǎng)狀況不同,。臨床常作的皮 下注射,即將藥液注入淺筋膜內(nèi),。(2)深筋膜 位于淺筋膜深面,,又稱固有筋膜,由致密結締組織構成,,遍于全身且互相連續(xù),。深筋膜包被 肌或肌群、腺體,、大血管和神經(jīng)等形成筋膜鞘,。四肢的深筋膜。伸入肌群之間與骨相連,,分隔肌群,,稱肌間隔。成纖維細胞是結締組織 的主要細胞成分,,細胞呈梭形或扁的星狀,,具有突起。剛分離的成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的人筋膜成纖維采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
實驗室分離的人筋膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,,含FBS、bFGF,、Insulin,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
人筋膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒 96T/48T
兔子脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 96T/48T
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 96T/48T
兔子孕激素/孕(PROG)試劑盒 96T/48T
小鼠補體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6試劑盒人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總糖蛋白樹脂法化試劑盒5次
HumanSeptokinase,SKELISAKit人鏈激酶(SK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
INTS1蛋白抗體
生長因子受體結合蛋白2抗體
IL17F重組大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
FUT8 Protein Human 重組人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標簽)
BST1 Protein Mouse 重組小鼠 CD157 / BST1 蛋白
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
FUT8 Protein Human 重組人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標簽)
IL17F重組大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
BST1 Protein Mouse 重組小鼠 CD157 / BST1 蛋白
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
人筋膜成纖維細胞大鼠白介素11(IL-11)試劑盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit
Mouse compleme 1 inhibitor aibody (C1INH) ELISA Kit 小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒
ELISA 小鼠瘦素受體(mouse Leptin receptor) 進口分裝
CLIAKitforIL-27(humanIerleukin27)ELISAKit人白介素27
通用型精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitPDGF-AB大鼠血小板衍生生長因子AB