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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
口腔 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8298 |
細胞簡介：
人口腔角質(zhì)形成分離自口腔組織,；口腔黏膜在組織學(xué)形態(tài)上分為上皮、固有層和黏膜下層,；口腔黏膜上皮細胞按是否參與角化被分為角質(zhì)形成細胞與非角質(zhì)形成細胞,，主要由角質(zhì)形成細胞構(gòu)成,；前者組成復(fù)層鱗狀上皮,，后者游離分布于上皮層內(nèi),。根據(jù)在口腔內(nèi)部位的不同,，復(fù)層鱗狀上皮可分為角化、不全角化或無角化型等幾類,。以角化型上皮為例,，由上皮的深面至淺面可分為基層、棘層,、粒層及角化層等四層,。
方法簡介：
實驗室分離的人口腔角質(zhì)形成采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的人口腔角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
人口腔角質(zhì)形成體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
乙醇酸氧化酶測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
錳過氧化物酶（MnP）測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣
鴨子β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒
Human ai thrombin receptor (A) ELISA Kit 人抗受體(A)試劑盒
HumanGlycatedhemoglobinA1c,GHbA1cELISAKit 人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforACV-AELISAKit大鼠活化素A
血液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性比色法定量試劑盒20次
MouseProinsulin,PIELISAKit小鼠胰島素原(PI)試劑盒
JmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去甲基化酶H3-K36抗體
視網(wǎng)膜母細胞瘤結(jié)合蛋白8抗體
ACVR2B重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (His 標簽) Protein
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
PDE2A重組人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 標簽) Protein
CALM2 Protein Human 重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標簽)
NGFR Protein Mouse 重組小鼠 NGFR / P75 蛋白
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
CALM2 Protein Human 重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標簽)
ACVR2B重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (His 標簽) Protein
NGFR Protein Mouse 重組小鼠 NGFR / P75 蛋白
PDE2A重組人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 標簽) Protein
人口腔角質(zhì)形成細胞大鼠白介素10(IL-10)試劑盒 ,，英文名： IL-10 ELISA Kit
Rabbit collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 兔子膠原酶I(Collagenase I)試劑盒
ELISA 小鼠促黃體生成激素(mouse LH) 進口分裝
CLIAKitforIL-27ELISAKit大鼠白介素27
通用型精(arginine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitPDGF大鼠血小板衍生生長因子
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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