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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人口腔黏膜成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：口腔黏膜
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
人口腔黏膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人口腔黏膜成纖維分離自口腔黏膜組織；口腔各壁都有黏膜覆蓋,，口腔黏膜在組織學(xué)上由上皮和固有層組成,，并借黏膜下層與深部組織相連?？谇火つさ那胺脚c唇部皮膚相連,，后面與咽部黏膜相延續(xù)，是消化道的前端,，因此其結(jié)構(gòu)和功能具有皮膚和消化道黏膜的某些特點(diǎn),。人口腔黏膜成纖維主要來(lái)自口腔黏膜固有層組織。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔黏膜成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒 96T/48T
兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)試劑盒 96T/48T
兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T
兔子壞死因子α(TNF-α)試劑盒 96T/48T
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 人糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒
Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 人型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKi人骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物總巰基含量熒光定量試劑盒20次
HumanSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒規(guī)格：96T/48T
Kelch樣蛋白18抗體
受體活性修飾蛋白1抗體
IL2RB重組人 CD122 / IL-2RB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1)
COL6A3重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白 Protein
FUT10 Protein Human 重組人 FUT10 / Fucosyltransferase 10 蛋白
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
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COL6A3重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白 Protein
人口腔黏膜成纖維細(xì)胞大鼠白介素10(IL-10)試劑盒 ,，英文名： IL-10 ELISA Kit
Mouse compleme 3 (C3) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒
ELISA 小鼠(mouse Lysozyme) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-23(MouseIerleukin23)ELISAKit小鼠白介素23
通用型精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitTPO大鼠血小板生成素
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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