詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
臍帶血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X8301 |
細(xì)胞簡介:
人臍帶血造血干分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出,、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液,。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),,臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞,可用于造血干細(xì)胞移植,,因此,,臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細(xì)胞,,干細(xì)胞是生命的種子,,它會分化成機(jī)體的各種細(xì)胞,結(jié)出各種不同的果實——血液細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞,、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新,、高度增殖和多項分化潛能的細(xì)胞群體,;這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞,,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用,。造血干細(xì)胞具有自我更新能力并能分化為各種血細(xì)胞的前提細(xì)胞,終生成各種血細(xì)胞成分,,包括紅細(xì)胞,,白細(xì)胞和血小板。造血干細(xì)胞需要根據(jù)機(jī)體的生理需求適時的補(bǔ)充血液系統(tǒng)各個成熟細(xì)胞組分,。同時在損傷,、炎癥等應(yīng)激狀態(tài)下,造血干細(xì)胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細(xì)胞組分的生理平衡的角色,。臨床治療中,,造血干細(xì)胞移植廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,,比如淋巴瘤,,生殖細(xì)胞瘤,乳腺癌,,小細(xì)胞肺癌,,主要應(yīng)用于常規(guī)治療失敗或復(fù)發(fā)難治以及具有不良預(yù)后因素的患者。造血干細(xì)胞以不對稱有絲分裂方式進(jìn)行增殖,,一個干細(xì)胞分裂產(chǎn)生兩個子細(xì)胞,,一個分化為造血祖細(xì)胞,,另一個則保持干細(xì)胞特征。造血干細(xì)胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細(xì)胞同時,,保持自己既不增殖也不分化,。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適,造血干細(xì)胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右,。 造血干細(xì)胞體外增殖培養(yǎng)需要基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)(滋養(yǎng)層細(xì)胞),,缺少滋養(yǎng)層細(xì)胞不增殖,無法長期培養(yǎng),,本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細(xì)胞灌裝發(fā)貨,,不包含滋養(yǎng)層,因此收貨后建議盡快實驗,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂??;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介:
實驗室分離的人臍帶血造血干采用采集臍帶血,、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的人臍帶血造血經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、SCF、IL-3,、TPO,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不建議傳代
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
人臍帶血造血干體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒,、兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒,、兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人胎兒 人胎兒 規(guī)格型號:96T/48T 人胎兒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人胎兒、人胎兒血紅蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒
HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 人FMS樣酪激酶3(Flt3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBonemorphogeneticprotein2,BMP-2試劑盒人骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總巰基含量比色法定量試劑盒20次
HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒規(guī)格:96T/48T
KLRA1(Ly-49a)抗體
順氯氨鉑耐藥相關(guān)蛋白9抗體
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NKG2D(natural killer cell group 2D 0.5mgNKG2D(natural killer cell group 2D) NK細(xì)胞受體/自然殺傷細(xì)胞活化性受體
WFIKKN2重組人 WFIKKN2 / GASP-1 蛋白 Protein
FUOM Protein Human 重組人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白
CNTN1 Protein Mouse 重組小鼠 Contactin 1 / CNTN1 蛋白
NKG2D(natural killer cell group 2D 0.5mgNKG2D(natural killer cell group 2D) NK細(xì)胞受體/自然殺傷細(xì)胞活化性受體
FUOM Protein Human 重組人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CNTN1 Protein Mouse 重組小鼠 Contactin 1 / CNTN1 蛋白
WFIKKN2重組人 WFIKKN2 / GASP-1 蛋白 Protein
人臍帶血造血干細(xì)胞大鼠白蛋白(albumin)試劑盒 ,,英文名: albumin ELISA Kit
Mouse compleme 4 (C4) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒
ELISA 小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-21ELISAKit大鼠白介素21
通用型科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitPAF大鼠血小板活化因子