化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人食管癌成纖維細胞
組織來源：食管癌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
人食管癌成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
人食管癌成纖維分離自食管癌組織,；食管癌是常見的消化道腫瘤,，每年約有30萬人死于食管癌。其發(fā)病率和死亡率各國差異很大,。我國是世界上食管癌高發(fā)地區(qū)之一,，每年平均病死約15萬人。男多于女,，發(fā)病年齡多在40歲以上,。食管癌典型的癥狀為進行性咽下困難，先是難咽干的食物,，繼而是半流質(zhì)食物,，后水和唾液也不能咽下。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
實驗室分離的人食管癌成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的人食管癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit ELISA.
豬透明質(zhì)酸(HA)ELISAKit ELISA.
豬瘦素(LEP)ELISAKit ELISA.
豬(SS)ELISAKit ELISA.
豬辛型肝病毒(TTV)試劑盒
Human maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒
RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 兔血管生成素2(ANG-2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-HAV(Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody)ELISAKit人抗甲型肝病毒IgG抗體
血液L-乳酸比色法定量試劑盒20次
Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豬肝細胞生長因子(HGF)試劑盒
LYPD4蛋白抗體
絲/蘇蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)亞基10抗體
CD4重組小鼠 CD4 蛋白 (His 標簽) Protein
CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer 0.5mgCD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)
PPARG重組人 PPARG / Nr1c3 / PPARgamma 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
BIN1 Protein Human 重組人 BIN1 / Amphiphysin-II 蛋白 (His 標簽)
PDCD1 Protein Rat 重組大鼠 PD1 / PDCD1 蛋白
CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer 0.5mgCD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)
BIN1 Protein Human 重組人 BIN1 / Amphiphysin-II 蛋白 (His 標簽)
CD4重組小鼠 CD4 蛋白 (His 標簽) Protein
PDCD1 Protein Rat 重組大鼠 PD1 / PDCD1 蛋白
PPARG重組人 PPARG / Nr1c3 / PPARgamma 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
人食管癌成纖維細胞大鼠癌胚抗原(CEA)試劑盒 ，英文名： CEA ELISA Kit
Rabbit macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 兔子巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒
ELISA 小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(mouse MDC) 進口分裝
CLIAKitforIL-2ELISAKIT大鼠白介素2
通用型科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitFDP大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物
收到細胞如何處理,？
1,、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
化工儀器網(wǎng)