化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：人外周血B淋巴細(xì)胞
組織來(lái)源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含IL-2,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不建議傳代
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
人外周血B淋巴體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人外周血B淋巴分離自外周血,；B淋巴細(xì)胞的祖細(xì)胞存在于胎肝的造血細(xì)胞島中，此后B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生和分化場(chǎng)所逐漸被骨髓所代替,。B淋巴細(xì)胞簡(jiǎn)稱B細(xì)胞,，成熟的B細(xì)胞主要定居于淋巴結(jié)皮質(zhì)淺層的淋巴小結(jié)和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結(jié)內(nèi),。B細(xì)胞在抗原刺激下可分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可合成和分泌抗體(免疫球蛋白),，主要執(zhí)行機(jī)體的體液免疫,。與T淋巴細(xì)胞相比，它的體積略大,。這種淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,，會(huì)增殖分化出大量漿細(xì)胞。漿細(xì)胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán),。從骨髓來(lái)的干細(xì)胞或前B細(xì)胞,，在遷入法氏囊或類囊器官后，逐步分化為有免疫潛能的B細(xì)胞,。成熟的B細(xì)胞經(jīng)外周血遷出，進(jìn)入脾臟,、淋巴結(jié),，主要分布于脾小結(jié)、脾索及淋巴小結(jié),、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小結(jié)中,，受抗原刺激后，分化增殖為漿細(xì)胞,，合成抗體,，發(fā)揮體液免疫的功能。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血B淋巴采用取外周血,、通過(guò)密度梯度離心法結(jié)合磁珠分選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血B淋巴經(jīng)CD19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔組織因子試劑盒 兔組織因子試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔組織因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔組織因子試劑盒、兔組織因子eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
兔組織因子途徑抑制物試劑盒 兔組織因子途徑抑制物試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔組織因子途徑抑制物試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔組織因子途徑抑制物試劑盒,、兔組織因子途徑抑制物eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
豚鼠γ干擾素試劑盒 豚鼠γ干擾素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 豚鼠γ干擾素試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠γ干擾素試劑盒,、豚鼠γ干擾素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
豚鼠白介素12試劑盒 豚鼠白介素12試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 豚鼠白介素12試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠白介素12試劑盒、豚鼠白介素12eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostaglandin F (PGF) ELISA Kit 大鼠前列腺素F(PGF)試劑盒
HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBlockingaibody,BA試劑盒人封閉抗體(BA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量試劑盒20次
HumanSomelysin-3,ST3ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
MARCKS樣蛋白1抗體
絲蛋白酶抑制劑B9抗體
DSC2重組大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein
EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3 0.5mgEBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病毒編碼核蛋白-3
PTPN2重組人 PTPN2 / TC-PTP 蛋白 (aa 1-314, His & GST 標(biāo)簽) Protein
FTH1 Protein Human 重組人 FTH1 蛋白
SERPINB10 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinB10 蛋白
EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3 0.5mgEBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病毒編碼核蛋白-3
FTH1 Protein Human 重組人 FTH1 蛋白
DSC2重組大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein
SERPINB10 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinB10 蛋白
PTPN2重組人 PTPN2 / TC-PTP 蛋白 (aa 1-314, His & GST 標(biāo)簽) Protein
人外周血B淋巴細(xì)胞大鼠阿米洛利敏感通道α亞基(SCNN1A)試劑盒 ,，英文名： SCNN1A ELISA Kit
Mouse compleme fragme 5A (C5a) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)試劑盒
ELISA 小鼠髓過(guò)氧化物酶(mouse MPO) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-1sRIIELISAKit大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ
通用型科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性試劑盒20次
ELISAKitFbg大鼠血纖蛋白原
化工儀器網(wǎng)