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人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X8307 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠腎小管上皮細(xì)胞 人毛囊干細(xì)胞 LIX1抗體 小鼠軟骨細(xì)胞 有絲分裂著絲粒相關(guān)驅(qū)動蛋白抗體 小鼠肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞 KIAA2013蛋白抗體 RT4-D6P2T大鼠神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞

詳細(xì)介紹

人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形,、梭形、多角形,,形態(tài)多樣

YS-01X8307

細(xì)胞簡介:

人外周血DC分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,;外周血是除骨髓之外的血液,,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未 成熟樹突狀細(xì)胞,,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,,在GM- CSFIL4的作用下形成葡萄串樣集落,,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,,具有較強(qiáng)的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,,貼壁形態(tài)多樣,。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,,多數(shù)呈懸浮生長,, 細(xì)胞呈圓形,,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),,伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞,。未成熟DC細(xì)胞長時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志,、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定,。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80,、CD86等共刺激分子,,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動,、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),;未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化,、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng) 答,,不能激活T細(xì)胞的第二信號,可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80,、CD86,、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4,、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,、 細(xì) 胞形態(tài)等綜合鑒定,,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形,、梭形,、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%CO2,,5%

人外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)


公司正在出售的產(chǎn)品:

鹽酸甜菜堿   100g

Betaine,Hydrochloride   500g

BEZ235 (NVP-BEZ235)   50mg

BEZ235(NVP-BEZ235)   100mg

鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neuronal nuclear aibody type 2 / ai Ri aibody (ANNA-2/Ri) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體2/Ri抗體(ANNA-2/Ri)試劑盒

Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 人血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAChE(HumanAcetylcholinesterase)ELISAKit人乙酰酯酶

藥片抗壞血酸比色法定量試劑盒20

MousePhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit小鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒規(guī)格:96T/48T

NADH復(fù)合體1抗體

髓過氧化物酶抗體

OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)細(xì)胞谷運(yùn)載蛋白3抗原

SRPK3重組人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白

CRP Protein Mouse 重組小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白

EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)細(xì)胞谷運(yùn)載蛋白3抗原

CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白

OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CRP Protein Mouse 重組小鼠 CRP / C-Reactive 蛋白

SRPK3重組人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

人外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)大鼠δ基乙酰脫水酶(ALAD)試劑盒 ,,英文名: ALAD ELISA Kit

Rabbit ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒

ELISA 小鼠巨噬細(xì)胞游走抑制因子(mouse MIF)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1sRI(Rabbitsolubleierleukin-1receptorI)ELISAKit兔子白介素1可溶性受體I

通用型辣椒輕斑駁病毒(PepperMildMottleVirus;PMMV)試劑盒20

ELISAKitTM大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白


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