化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：人胃癌成纖維細(xì)胞
組織來源：胃癌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
人胃癌成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介：
人胃癌成纖維分離自患有胃癌病人的胃癌組織,；胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,，胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,，其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部，胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累,，絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌,。在胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的過程中，涉及諸多復(fù)雜的過程,，如細(xì)胞外基質(zhì)的硬化和降解,、新生血管的形成等，而這些過程會直接或間接的引起腫瘤微環(huán)境(Tumor mircoenvironment)的改變,。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細(xì)胞生存的外部環(huán)境,，由不同種類的非腫瘤性的細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix，ECM)構(gòu)成,，包括纖維細(xì)胞,，免疫細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞,，間充質(zhì)干細(xì)胞等,，腫瘤細(xì)胞通過調(diào)控這些間質(zhì)細(xì)胞，創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,，從而使得腫瘤得到進(jìn)展,。越來越多的證據(jù)表明，腫瘤微環(huán)境的改變在腫瘤進(jìn)展中扮演著重要的角色,。在腫瘤微環(huán)境中,，研究多也是主要的間質(zhì)細(xì)胞是腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞演化而來,。胃癌成纖維細(xì)胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。剛分離的胃癌成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介：
實驗室分離的人胃癌成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的人胃癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
神經(jīng)營養(yǎng)素 4(-4) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T
骨橋蛋白 ( Osteopoin) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 德國 IBL
OX-40 ELISA Kit 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
Human sP53 Kit 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 法國 Diaclone
豚鼠特異性免疫球蛋白E(sIgE)試劑盒 96T/48T
Human systemic lupus erythematosus (SLE) ELISA Kit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒
Humanansthyretin,TELISAKit 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanc-sis試劑盒人c-sis試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織EGFR激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanprostacycline,PGIELISAKit人前列環(huán)素(PGI)試劑盒規(guī)格：96T/48T
NDUFAF7蛋白抗體
胎盤催乳素1/2抗體
IFNA5重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
角蛋白1(KRT1)重組蛋白 Recombinant Keratin 1 (KRT1)
BIN2重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 Protein
IL12RB1 Protein Human 重組人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 蛋白
HAVCR1 Protein Canine 重組狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白
角蛋白1(KRT1)重組蛋白 Recombinant Keratin 1 (KRT1)
IL12RB1 Protein Human 重組人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 蛋白
IFNA5重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HAVCR1 Protein Canine 重組狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白
BIN2重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 Protein
人胃癌成纖維細(xì)胞大鼠γ-基受體亞基α1(GABRA1)試劑盒 ,，英文名： GABRA1 ELISA Kit
Mice, superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
ELISA 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-17ELISAKIT大鼠白介素17
通用型亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitADAMTS13/vWF-cp大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶
化工儀器網(wǎng)