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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 雙極,、多極形 | YS-01X7716 |
細胞簡介：
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體分離自腦皮層組織,；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標本中,，少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小,，其突起也較小而少，呈珠狀,，故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞,。少突膠質(zhì)細胞（oligodendrocyte）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細胞，其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細胞祖細胞,、前少突膠質(zhì)細胞祖細胞,、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型,。但是,，細胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程，其形態(tài),、表達產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴格的界限,，因此，其分類是相對的,。這三型分別為：Ⅰ型少突膠質(zhì)細胞又稱前O2A（pre-O2A progenitor cell）,。細胞呈圓形，表面光滑,，直徑約3μm,，體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面，具有很強的分裂增殖潛力,，表達GM1,、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等,。Ⅱ型少突膠質(zhì)細胞胞體常有雙極或三極突起,，極少數(shù)為單極突起，直徑約7μm,，有一定的分裂增殖能力,。體外培養(yǎng)時為雙潛能細胞，既可分化為少突膠質(zhì)細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),，故又稱為少突膠質(zhì)細胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,，O2A）。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3和GQ（淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體），故常用A2B5抗體標記O2A,。Ⅲ型少突膠質(zhì)細胞不再具有分裂增殖能力,，為分裂終期細胞。直徑約10μm,。根據(jù)其形成髓鞘的能力,，又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細胞。不成熟的OL胞體常伸出4～5條較粗大突起,，表面還殘留有A2B5標記物,，同時也表達O1-O4抗原，無形成髓鞘的能力,。成熟的少突膠質(zhì)細胞突起有如蜘蛛網(wǎng),，大量表達半乳糖腦苷脂（galactocerebro side，GC）,、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein,，PLP）、髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein,，MBP）等,，有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細胞前體細胞（簡稱少突膠質(zhì)細胞前體細胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細胞,，前兩者具有增殖能力,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng),、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement,、PDGF,、bFGF、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2天半量換液1次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 雙極,、多極形
傳代特性 不傳代，不增值,，存活1-2周
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
血0濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
血濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
血清總鐵結(jié)合能力測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai neuophil cytoplasmic aibody (cANCA) ELISA Kit 人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)試劑盒
HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit 人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABeta1-42ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-42
乙四乙酸(EDTA)細胞脫離溶液100毫升
MouseMyosin,MYSELISAKit小鼠肌球蛋白(MYS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
P選擇素/白細胞內(nèi)皮細胞粘附分子3抗體
KB抑制蛋白激酶β單克隆抗體
F11R重組小鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N 0.5mgANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原
PA2G4重組人 EBP1 / PA2G4 蛋白 Protein
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
CD68 Protein Rat 重組大鼠 CD68 / Macrosialin 蛋白
白介素7(IL7)重組蛋白 Recombinant Interleukin 7 (IL7)
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
LILRB3重組小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (Fc 標簽)
GUCA1A重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)試劑盒 ，英文名： TSLC1 ELISA Kit
Porcine soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒
豬特定基因序列(Porcine)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMAO(Humanmonoamineoxidase)ELISAKit人單胺氧化酶
體液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitSAA血清淀粉樣蛋白A
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行
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