詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7485 |
細(xì)胞簡介:
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)分離自腦組織,;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,,它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3),、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,,溝或裂之間的隆起叫回,,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂,、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,,使大腦皮質(zhì)組分為額葉,、頂葉、顳葉,、枕葉四大部分,。神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,是哺乳動物腦內(nèi)分布泛的一類細(xì)胞,,也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積最大的一種,。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)(銀染色)顯示此類膠質(zhì)細(xì)胞呈星形,從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,,伸展充填在神經(jīng)細(xì)胞的胞體及其突起之間,,起支持和分隔神經(jīng)細(xì)胞的作用。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,,有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上,,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面,,彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜,。細(xì)胞剛分離時(shí)呈圓形,24h后大部分細(xì)胞貼壁,,均勻分布于瓶底,,部分細(xì)胞伸出細(xì)小突起,培養(yǎng)4-5d后細(xì)胞數(shù)量明顯增多,,呈扁平,、多角形,胞質(zhì)豐富且核漿較少,,細(xì)胞核呈橢圓形,,偏于胞體一側(cè)。神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成,,不僅具有支持功能,,還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質(zhì),,在維持神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境、生存,、遷移,、免疫調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血清淀粉樣蛋白 (SAA) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
人 Salusin- a ( Salusin- a ) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
干細(xì)胞因子 (SCF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
干細(xì)胞因子受體 (SCF R) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai apolipoprotein aibodies A1 (Apo A1) ELISA Kit 人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)試劑盒
HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAA(HumanArachidonicAcid)ELISAKit人花生四烯酸
乙醇沉淀法DNA萃取試劑盒20次
MouseNervegrowthfactor,NGFELISAKit小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
RB1的誘導(dǎo)卷曲蛋白RB1CC1抗體
LARP4蛋白抗體
HA重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rhBMP-2/BMP2 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 100ugrhBMP-2/BMP2 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2
CCNA1重組人 CCNA1 / Cyclin-A1 蛋白 Protein
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白
HAPLN1 Protein Human 重組人 HAPLN1 蛋白
rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein 100ugrHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重組乙肝病毒e抗原
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白
HA重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
GZMH Protein Human 重組人 Granzyme H 蛋白
VNN1重組人 VNN1 / Vanin-1 蛋白 Protein
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARL)試劑盒 ,,英文名: ARL ELISA Kit
Porcine soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 豬可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒
牛特定基因序列(Bovine)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMAGAb(Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody)ELISAKit人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體
體液(NO)活性熒光定量試劑盒50次
ELISAKitEMP紅細(xì)胞膜蛋白