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小鼠腎小管上皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7239 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠腎小管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體 鋅指蛋白69抗體 泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體 小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞 大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠乳腺癌細(xì)胞,;C127 人腎癌細(xì)胞+luc;A498-LUC-PURO

詳細(xì)介紹

小鼠腎小管上皮細(xì)胞

小鼠腎小管上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

腎組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7239

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠腎小管上皮分離自腎組織,;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,,以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素,、活性維生素D3、前列腺素,、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管,,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu),、分布位置和功能分成近端小管,、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,,曲部也稱為近曲小管,,位于皮質(zhì)迷路內(nèi),于腎小體附近高度蟠曲,;遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管,,位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞,,腎小管上皮細(xì)胞的分離,、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項(xiàng)重要技術(shù),目前該分離方法有酶分離法,、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法,、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等,。腎小管上皮細(xì)胞主要功能:①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸,;②排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿;③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子,,通過(guò)產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng),;④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2RMHC-Ⅱ類抗原,這說(shuō)明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生,。隨著對(duì)腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深,,腎小管上皮細(xì)胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,,提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型,,在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小管上皮采用先機(jī)械研磨過(guò)不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管,、后用膠原酶消化,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

小鼠腎小管上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠腎小管上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠抑制素A   英文名稱:   Insulin A   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   Inhibin A

小鼠抑制素B   英文名稱:   Insulin B   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   Inhibin B

小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白IP-10   英文名稱:   induced protein 10   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   IP-10

小鼠8異前列腺素   英文名稱:   8-isoprostane F2α   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   8-iso-PG

小鼠血清(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T

One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒

Humanβ-lactamaseELISAKit 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白

熒光穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升

MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)試劑盒規(guī)格:96T/48T

?磷酸葡萄糖變位酶/?-phosphoglucomutase抗體

NFKB激活蛋白1抗體

IL2RG重組小鼠 IL2RG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CK18(Cytokeratin 18 0.5mlCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18抗原(C)

N6AMT1重組人 N6AMT1 / HEMK2 蛋白 Protein

CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

CD200R1 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

NKB (Neurokinins B 0.5mgNKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B(抗原)

CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

FGF14重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白 Protein

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白

PTX3重組人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 蛋白 Protein

小鼠腎小管上皮細(xì)胞大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP)試劑盒 ,,英文名: DPP ELISA Kit

Porcine endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒

鵝特定基因序列(Goose)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforM30(MouseEmbryonicStemMESPU30)ELISAKit小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30

體液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶(iNOS/NOS2/mNOS)活性熒光定量試劑盒20

ELISAKitAIL-R3雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3


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