詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7623 |
細胞簡介:
小鼠腎小球上皮分離自腎組織,;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,,以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素,、促紅細胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,,被鮑氏囊所包裹,,是尿液形成的重要構造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球,。腎小球上皮細胞是由間充質(zhì)細胞分化發(fā)育,、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細胞,是腎小球的固有細胞之一,,也是構成腎小球濾過膜的重要組成部分,。腎小球上皮細胞的正常結構和功能是腎單位濾過及腎小球微環(huán)境穩(wěn)定的重要保障。腎小球濾過膜的最外層為上皮細胞層,,厚約40nm,,腎小球上皮細胞是腎小囊的臟層上皮細胞,貼附于腎小球血管外側基底膜上,。上皮細胞又稱足細胞,,足細胞的不規(guī)則突起為足突,其間有許多狹小間隙,,血液經(jīng)濾過膜過濾入腎小球囊,。腎小球上皮細胞可通過合成和分泌腎上腺髓質(zhì)肽抑制系膜細胞增殖,腎上腺髓質(zhì)肽作為一種重要的旁分泌因子,,可保持腎小球微環(huán)境穩(wěn)定,,并參與腎小球的炎癥過程。體外培養(yǎng)的腎小球上皮細胞對各型腎小球腎炎具有重要的研究價值,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腎小球上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腎小球上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素15(IL-15)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素13(IL-13)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素12(IL-12/P40)試劑盒 96T/48T
小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuroophin 3 (-3) ELISA Kit 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒
humanadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCV試劑盒人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
Humanurinarybladdercanceraigen,UBCELISAKit人膀胱癌抗原(UBC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TOM1蛋白抗體
N-鈣粘附分子抗體
VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標簽) Protein
FAS (Apo-a1; CD95; 0.5mgFAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1
CSTB重組人 Cystatin B / CSTB 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白
CD19 Protein Mouse 重組小鼠 CD19 / Leu-12 蛋白
Ractopamine/BSA 萊克多巴胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 1mgRactopamine/BSA 萊克多巴胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白
NS1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural / NS1 蛋白 Protein
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (Fc 標簽)
TNFRSF4重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 Protein
小鼠腎小球上皮細胞大鼠二(MDA)試劑盒 ,英文名: MDA ELISA Kit
Mouse ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 小鼠α干擾素(IFN-α)試劑盒
ELISA 小鼠內(nèi)皮細胞合酶(mouse eNOS) 進口分裝
CLIAKitforKLHELISAKit小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白
通用型大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)試劑盒20次
ELISAKitTGFβ2大鼠轉化生長因子β2
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行