詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠腎小球系膜細(xì)胞
組織來(lái)源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠腎小球系膜分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過(guò)濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球,。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,,匯流入靜脈,而是流入出球小動(dòng)脈,。在腎小球內(nèi),,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi),。腎小球與鮑氏囊合稱(chēng)為腎小體,,腎小球的過(guò)濾速率便稱(chēng)為腎小球過(guò)濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),,由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成,。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非常活躍的細(xì)胞,,具有分泌細(xì)胞基質(zhì),、產(chǎn)生細(xì)胞因子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類(lèi)似平滑肌細(xì)胞收縮的功能,。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過(guò)多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn),。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法,。系膜細(xì)胞的主要作用可能有:①收縮作用,,入球小動(dòng)脈和出球動(dòng)脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié),以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過(guò)率,;②支持作用,,它填充于毛細(xì)血管袢之間,支持毛細(xì)血管的位置,;③吞噬作用,,能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì);④分泌腎素,,在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時(shí),,系膜細(xì)胞增生且分泌腎素。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球系膜采用機(jī)械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾后使用膠原酶消化制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球系膜經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒 96T/48T
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)試劑盒 96T/48T
小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒 96T/48T
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ulasensitive thyroid stimulating hormone (U-TSH) ELISA Kit 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒
HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit 人天門(mén)冬氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-Ⅲ試劑盒雞抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞BAD蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHistamine,HISELISAKit小鼠組胺(HIS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TRIM9蛋白抗體
p21激活激酶2抗體
HA重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c 0.5mgPAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原)
METTL1重組人 METTL1 蛋白 Protein
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白
APP Protein Human 重組人 APP / Protease nexin-II 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c 0.5mgPAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原)
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白
HA重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
APP Protein Human 重組人 APP / Protease nexin-II 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
METTL1重組人 METTL1 蛋白 Protein
小鼠腎小球系膜細(xì)胞大鼠兒茶酚抑素(CST)試劑盒 ,,英文名: CST ELISA Kit
Pigskin quality ketone / coicosterone (CO) ELISA Kit 豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒
魚(yú)特定基因序列(Fish)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforLZM(MouseLysozyme)ELISAKit小鼠
體液總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitIGF-1雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1