操作步驟:

1）使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內,。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
7）每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8）取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果,。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值,。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,，我司嚴格按照進行,，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的批號,，只要客戶提前下單,，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,，值得您選擇,。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后,，再進行測定,，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,，以滿足后面的測定需求,。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,；
③檢測抗原時,，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本,；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等,；
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩,，以防溶血,；收集標本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存,；保存時間不宜過久,，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,，并放入37℃水中1 h,，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優(yōu)點：
一,、高效,、靈敏、特異的抗體；
二,、穩(wěn)定的重復性和可靠性,；
三、吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高的固相載體；
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型；
五,、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費,。

2,4Dimethylaniline2,4二95681

2Anisidine4sulfonicacid鄰氨498420

1NCbz3pyrrolidinoneN芐羰3130312026

(1S,2S,5R)3AZABICYCLO[3.1.0]HEXANE2CARBOXYLICACID(1R,2S,5S)3雜雙環(huán)[3.1.0]2羧33294814

Glycerite單1401554

Acetoxyacetylchloride酰酰13831317

NADesiclay礦物干燥

SieberLinker3羥9H占噸93722518

HCYS(BZL)OMEHCLS芐L半胱氨16741803

1,1Dimethoxyethane二534156

Scandiumoxide化鈧(Ⅲ)12060081

4chlorotoluene2sulphonylchloride52酰34981389

2,6DIFLUOROBENZOPHENONE2,6二二59189514

FmocDtryptophanFmocD色氨86123117

2Chlorophenylisocyanate鄰異3320830

生脈提取物Shengmai extract保存：20℃,，避光規(guī)格：10mg

桃葉干浸膏Peach dryextract保存：20℃，避光規(guī)格：0.7g

狼毒素FischerianaB保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg/支

3,，29二酰栝樓仁三3, 29two benzoyl TrichosanthesJen three alcohol保存：20℃，避光規(guī)格：20mg

參麥提取物Shenmai extract保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg

蓖麻油Ricinoleicacid保存：20℃,，避光規(guī)格：0.1ml

蓖麻油Castoroilacid methylester保存：20℃，避光規(guī)格：0.2ml

蕊異黃葡萄糖苷Calycosin glucoside保存：20℃,，避光規(guī)格：約20mg/支

西貝母苷（暫行）Sipeimine glycosides (Provisional)保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg

4羥（對羥）4hydroxy benzene aceticacid (phydroxybenzoic acid)保存：20℃，避光規(guī)格：20mg

木蝴蝶苷BOroxinB保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg

木通苷B（荷苞花苷B）CalceolariosideB (Hebao linarin B)保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg/支

人參皂苷RoGinsenosideRo保存：20℃，避光規(guī)格：20mg

穗花杉雙黃Amentoflavone保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg

芫花素（暫行）Genkwanin (Provisional)保存：20℃,，避光規(guī)格：20mg
TIEG1 elisa試劑盒Polyphyllin B大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA Kit，48T/96T 25mg

Polyphyllin C兔抑瘤素M(OSM)ELISA Kit,，48T/96T 200mg

Polyphyllin E人血血小板衍長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)100mg

Polyphyllin F小鼠血小板衍長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)25mg

34487-61-1重組人 GSTM2 / GST4 蛋白 (His 標簽) 酚紅鈉

33012-29-2重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) 金橙黃

3248-91-7重組人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 標簽) 新品紅

947601-96-9重組人 HRAS / GTPase Hras 蛋白 (His 標簽) 分散黃3D3

270648重組人 HSPA8 / HSC70 蛋白 (His 標簽) 基紅

25956-17-6重組人 S100P / S100E 蛋白 惑紅

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣,，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實驗臺上,，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時,，即可終止酶反應,。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵,。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質,。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結果,，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法,。