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小鼠食管成纖維細胞

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更新時間:2024-11-04 14:45:18瀏覽次數(shù):883

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7918 主要用途 僅供科研研究實驗
小鼠食管成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:MSI2蛋白抗體 GTP酶IMAP家族成員7抗體 泛素結(jié)合酶E2J1抗體 小鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞 大鼠結(jié)腸平滑肌細胞 MEF小鼠胚胎成纖維細胞 人胚腎細胞-綠色熒光蛋白標記;HEK293T-COGFP-PURO

詳細介紹

小鼠食管成纖維細胞

小鼠食管成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

食管

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7918

細胞簡介:

小鼠食管成纖維分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,,隨著頸部的伸長和心肺的下降,,而逐漸增長,。食管可分為頸段,、胸段和腹段,。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),,胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,,食管的上皮細胞增殖,,由單層變?yōu)閺蛯樱彻苁构芮蛔儶M窄,,甚至一度閉鎖,,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層,、黏膜下層,、肌層和外膜。其中,,黏膜層,,包括上皮、固有層和黏膜肌層,。食管的外膜,,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,富有血管,、淋巴管及神經(jīng),。主要包含食管成纖維細胞,,成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡介:

實驗室分離的小鼠食管成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠食管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS,、bFGFInsulin,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳2-3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

小鼠食管成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

小鼠食管成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠食管成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β2(mouse TGF-β2)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠可溶性粒細胞靶受體(mouse sEM-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)試劑盒 96T/48T

Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 人可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISAKit 人毛細血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor12-HETE(Human20-hydroxyeicosateaenoicacid)ELISAKit12羥二十烷四烯酸

飲料檸檬酸比色法定量試劑盒20

MouseLactoferrin,LTF/LFELISAKit小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

ZC3H7B蛋白抗體

PE-Cy5標記小鼠Ly-6G/Ly-6C單克隆抗體

NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)

NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein

小鼠食管成纖維細胞大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)試劑盒 ,,英文名: PYY ELISA Kit

Porcine hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 豬輕化1(HYD)試劑盒

動物源性成分(18S)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforLy6a(Humanlymphocyteaigen6complexlocusA)ELISAKit人淋巴細胞抗原6復合物基因座A

體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50

ELISAKitNO雞血清

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;

  2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;

  2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;

  3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;

  4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行



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