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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：小鼠食管上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：食管組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠食管上皮分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管,，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,，隨著頸部的伸長(zhǎng)和心肺的下降，而逐漸增長(zhǎng),。食管可分為頸段,、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,，胸段位于左,、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過(guò)膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,，腹段很短與胃相連,。在發(fā)育過(guò)程中，食管的上皮細(xì)胞增殖,，由單層變?yōu)閺?fù)層,，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖,，以后管腔又重新出現(xiàn),。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層,、肌層和外膜,。其中，黏膜層,，包括上皮,、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,，耐摩擦,，有保護(hù)作用,。在食管與胃賁門交界處,，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的,、無(wú)角化,、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋，其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入,。特別的是,，層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下。從組織學(xué)上講,，食管上皮由兩層組成,，基底層和分化層；其中,，僅基底層的細(xì)胞可以增殖,，然后向食管腔移行。移行過(guò)程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá),。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管上皮采用機(jī)械分離法結(jié)合組織貼塊法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）試劑盒 96T/48T
小鼠脂多糖（LPS）試劑盒 96T/48T
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 96T/48T
小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 人可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)試劑盒
Human17-ketosteroids,17-KSELISAKit 人17-酮類固醇(17-KS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3(Human1,25-dihydroxyvitaminD3)ELISAKit人1,25二羥基3
飲料糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶2抗體
PE標(biāo)記人Bcl-2單克隆抗體
IGSF8重組小鼠 PGRL / IGSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
半乳糖凝集素7(GAL7)重組蛋白 Recombinant Galectin 7 (GAL7)
CD58重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 Protein
CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白
CD86 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白
半乳糖凝集素7(GAL7)重組蛋白 Recombinant Galectin 7 (GAL7)
CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白
IGSF8重組小鼠 PGRL / IGSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD86 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白
CD58重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 Protein
小鼠食管上皮細(xì)胞大鼠多巴胺D2受體配體(D2RL)試劑盒 ，英文名： D2RL ELISA Kit
Porcine heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 豬熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒
蝦特定基因序列(FC)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforLUM(Humanlumican)ELISAKit人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白
體液總抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量試劑盒50次
ELISAKitHA雞透明質(zhì)酸
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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