操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
7）每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8）取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),，我司嚴格按照進行,，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,，只要客戶提前下單,，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,，不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,，值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后,，再進行測定,，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,，以滿足后面的測定需求,。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,；
③檢測抗原時,，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標(biāo)本,；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,；
2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等,；
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩,，以防溶血,；收集標(biāo)本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存,；保存時間不宜過久,，檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本；對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,，并放入37℃水中1 h,，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優(yōu)點：
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；
三、吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高的固相載體；
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五,、性價比非常好,，節(jié)省實驗經(jīng)費。

刺槐亭Tetramethylrhodamine-6-maleimide*Singleisomer*NADPH-OXNADPH化酶4檢測試盒

刺桐亭SRBsulfonylchloride[SulforhodamineBsulfonylchloride]TAPNADPH化酶檢測試盒

刺桐酚素Sulforhodamine101sulfonylchloridef-Hb胰蛋白酶原激活肽檢測試盒

刺桐特靈TRhydrazide[Sulforhodamine101sulfonylhydrazide]TBG游離血紅蛋白檢測試盒

刺五加甙CTRcadaverine[Sulforhodamine101cadaverinesulfonamide]VK狀腺結(jié)合球蛋白檢測試盒

粗毛甘草素AAMCAacid[3-(7-amino-4-methyl-2-oxo-2H-chromen-3-yl)propanoicacid]PDK維生素K檢測試盒
HCBⅡ elisa試劑盒48T/96TELISA Kit for C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase (MERTK)牛腦浸粉

48T/96TELISA Kit for Janus Kinase 3 (JAK3)HAT混合

48T/96TELISA Kit for Fibrinogen Gamma (FGg)

48T/96TELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9)HT混合

48T/96TELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle And Heart (FABP3)

48T/96TELISA Kit for Triiodothyronine (T3)牛膽

4657-00-5重組人 ATG8 / GABARAPL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 性橙22

4548-53-2重組人 SRI / Sorcin 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) 胭脂紅 SX

3861-73-2重組人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) 性藏藍R

3468-63-1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) 顏料橙 5

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察,，待對照管顯色適當(dāng)時,，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺,，在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。