詳細(xì)介紹
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效,、靈敏,、特異的抗體;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體;
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五,、性價(jià)比非常好,,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
產(chǎn)品名稱 | BA elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human Blocking antibody, BA Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),,即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,,再進(jìn)行測(cè)定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,,以滿足后面的測(cè)定需求,。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG,;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解,;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血,、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或凝固不全等,;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血,;收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管,,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過(guò)久,,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本,;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,,待充分凝固后再離心分離血清,。
2-異基雜蒽酮SuperECLPlusDetectionReagentGly亮基肽酶檢測(cè)試盒
二硝咪5(6)-FAM[5-(and-6)-Carboxyfluorescein]*Mixedisomers*VC甘檢測(cè)試盒
安塞蜜5(6)-FAM[5-(and-6)-Carboxyfluorescein]*Mixedisomers*PGF2α維生素C檢測(cè)試盒
2,6-二基萘5(6)-FAM[5-(and-6)-Carboxyfluorescein]*Mixedisomers*C5aR前列腺素F2α檢測(cè)試盒
3,5-二氯酚5-FAM[5-Carboxyfluorescein]*Singleisomer*HMGR補(bǔ)體片斷5a受體檢測(cè)試盒
三氯叔5-FAM[5-Carboxyfluorescein]*Singleisomer*RA羥基戊二單酰輔酶A還原酶檢測(cè)試盒
BA elisa試劑盒48T/96TELISA Kit for Keratin 81 (KRT81)PALCAM 瓊脂
48T/96TELISA Kit for Secretoglobin Family 2A, Member 2 (SCGB2A2)PALCAM添加
48T/96TELISA Kit for Myosin Light Chain 9, Regulatory (MYL9)LPM瓊脂
48T/96TELISA Kit for Cysteine Rich Transmembrane BMP Regulator 1 (CRIM1)Half –Fraser 培養(yǎng)
83602-39-5重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 環(huán)孢素H
23360-92-1重組人 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 (His 標(biāo)簽) 環(huán)長(zhǎng)春
40246-10-4重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 黃豆黃苷
40957-83-3重組人 CASP3 / Caspase-3 / CASP-3 蛋白 (His 標(biāo)簽) 黃豆黃素
486-90-8重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 黃華
83207-58-3,84687-43-4重組人 STX8 / Syntaxin 8 蛋白 (His 標(biāo)簽) 黃芪苷
操作步驟:
1)使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí),。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8)取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。