化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7570 |
細胞簡介：
小鼠視網(wǎng)膜前體分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光,、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層,、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用,；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層,，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,，而視錐細胞則在中心凹處最多,。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,，負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導,。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū),，其分辨能力,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜前體采用消化法結(jié)合專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜前體經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF,、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒、小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。
小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒,、小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠脂聯(lián)素試劑盒 小鼠脂聯(lián)素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠脂聯(lián)素試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脂聯(lián)素試劑盒,、小鼠脂聯(lián)素試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。
小鼠脂蛋白試劑盒 小鼠脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠脂蛋白試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠脂蛋白試劑盒,、小鼠脂蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)試劑盒 96T/48T
Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒
Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶
飲料比色法定量試劑盒20次
MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒規(guī)格：96T/48T
癌胚抗原單克隆抗體（檢測）
piwi樣2蛋白抗體
CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗原
RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein
CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標簽)
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)
GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗原
CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標簽)
CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)
RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein
小鼠視網(wǎng)膜前體細胞大鼠多巴胺(DA)試劑盒 ,，英文名： DA ELISA Kit
Porcine heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
馬特定基因序列(Hor)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTC4(MouseLeukoieneC4)ELISAKit小鼠白三烯C4
體液總巰基含量熒光定量試劑盒20次
ELISAKitADM雞腎上腺髓質(zhì)素
化工儀器網(wǎng)