詳細介紹
具有如下優(yōu)點:
一、高效,、靈敏,、特異的抗體;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體;
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五,、性價比非常好,,節(jié)省實驗經(jīng)費。
產(chǎn)品名稱 | EBMZ elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human epidermal basement membrane zone, EBMZ Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求,。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,,即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,,已獲得國家承認的“三證”,,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,,再進行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,,以滿足后面的測定需求,。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG,;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解,;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血,、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等,;
控制方法:采血時規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血,;收集標(biāo)本時采用無菌試管,,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本,;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,,待充分凝固后再離心分離血清,。
去茯苓100mL*小鼠外周血白細胞*培養(yǎng)基
刺五加苷D100mL現(xiàn)貨供應(yīng)小鼠骨髓基質(zhì)細胞*培養(yǎng)基
葫蘆素IIA100mL小鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基
β,β-二基酰紫草素100mL上海直銷小鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基
黃華100mL*小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基
4-基七葉亭100mL現(xiàn)貨供應(yīng)小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基
EBMZ elisa試劑盒48T/96TELISA Kit for MARCKS Related Protein (MARCKSL1)O/F培養(yǎng)(HLGB)
48T/96TELISA Kit for L1-Cell Adhesion Molecule (L1CAM)化鈉結(jié)晶紫增液
48T/96TELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 10 (SIGLEC10)化鈉蔗糖瓊脂
48T/96TELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 9 (DPP9)嗜選擇性瓊脂
61301-33-5重組人 Insulin / INS 蛋白 五味子素
58546-54-6重組人 Gastric lipase / LIPF 蛋白 (His 標(biāo)簽) 五味子
61281-38-7重組人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) 五味子素
61281-37-6重組人 PGD2 / PGDS / HPGDS 蛋白 (His 標(biāo)簽) 五味子素
58546-56-8重組人 RBP5 / Retinol binding protein 5 蛋白 (His 標(biāo)簽)五味子酯
32981-86-5重組人 CLIC1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 10-脫酰卡III
操作步驟:
1)使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時,。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8)取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。