小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：GTP結(jié)合蛋白7抗體 G激酶錨定蛋白1抗體 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2B4抗體 小鼠外周血樹突狀細胞(DC細胞) 大鼠脊髓神經(jīng)元細胞 GL-261小鼠膠質(zhì)細胞瘤 人胃癌細胞-LUC-EGFP;HGC27-LUC-EGFP-PURO

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產(chǎn)品名稱：小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

組織來源：視網(wǎng)膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光,、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成,。神經(jīng)元是視細胞層，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,，而視錐細胞則在中心凹處最多,。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,，負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導,。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū),，其分辨能力,。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細胞具有不同的特性，在腦和視網(wǎng)膜中,，這些內(nèi)皮細胞具有內(nèi)屏障的功能，在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),，釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、最后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）,、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細胞如何處理,？

1、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble ansferrin receptor (sTfR) ELISA Kit 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)試劑盒

Human5-Nucleotidase,5-ELISAKit 人5核苷酸酶(5-)試劑盒 96T/48T 進口分裝

(pIKBAlpha)ELISAKit大鼠0酸化核因子κB抑制蛋白α

飲料糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量試劑盒20次

Mouseisletcellaibody,ICAELISAKit小鼠胰島細胞抗體(ICA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

白細胞介素1受體銜接蛋白抗體

RASGEF1C蛋白抗體

REG4重組小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白 Protein

AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase 0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基?；缚乖?/span>

IL36A重組人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158) Protein

CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白

TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標簽)

AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase 0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基酰基消旋酶抗原

CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白

REG4重組小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白 Protein

TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標簽)

IL36A重組人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158) Protein

小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞大鼠頂體蛋白(ACR)試劑盒 ,，英文名： ACR ELISA Kit

Porcine growth hormone releasing peptide GHR 豬生長激素釋放肽ghr

木瓜特定基因序列(Papaya)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTB4(HumanLeukoieneB4)ELISAKit人白三烯B4

體液組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitHsp-60雞熱休克蛋白60