化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7730 |
細胞簡介：
小鼠視網(wǎng)膜微血管周分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層,，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光,、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內顆粒層,、內叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層,、內界膜,。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用,；后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層,，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,，而視錐細胞則在中心凹處最多,。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,，負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū)，其分辨能力,。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質對維持血管張力,、調節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。周細胞（pericyte）又稱Rouget細胞和壁細胞,，是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞，可以收縮,。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中,，通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內皮細胞的成熟過程,。此外,，周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,，其多功能性是目前研究的熱點之一,，所以對血管周細胞的生物學特征、標記物,、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料,。周細胞產(chǎn)生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜,，基膜上有多種細胞連接,，包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素,、纖連蛋白以及接合素,。它還參與毛細血管直徑的雙向調控；毛細血管受損時,，周細胞還可增殖,，分化為內皮細胞和成纖維細胞。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管周采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右,；
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠B6(VB6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA 試劑盒 96T/48T
The human influenza virus aibody IgG (FLU) ELISA Kit 人流感病毒抗體IgG(FLU)試劑盒
HumanProteinZELISAKit 人蛋白Z(ProteinZ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPH試劑盒雞腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞P27蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousefractalkine/CX3CL1ELISAKit小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
半胱雙加氧酶1抗體
RAS家族關聯(lián)結構域蛋白6抗體
CD14重組人 CD14 蛋白 (Fc 標簽) Protein
醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白 Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)
CNKSR3重組人 MAGI1 / CNKSR3 蛋白 (GST 標簽) Protein
CEACAM8 Protein Human 重組人 CEACAM8 / CD66b 蛋白
NP Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)
醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白 Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)
CEACAM8 Protein Human 重組人 CEACAM8 / CD66b 蛋白
CD14重組人 CD14 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NP Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)
CNKSR3重組人 MAGI1 / CNKSR3 蛋白 (GST 標簽) Protein
小鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞大鼠丁酰酯酶(BCHE)試劑盒 ,，英文名： BCHE ELISA Kit
One two D dimer (D2D) ELISA Kit 人D二聚體(D2D)試劑盒
Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforD1R(MouseDopamineD1receptor)ELISAKit小鼠多巴胺D1受體
細胞色素P450亞酶2C19(S-MEPHENYTOIN)活性高效液相色譜法(HPLC)定量試劑盒20次
Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKit大鼠膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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