操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一,、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證”,，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,，不必擔心會有過期的試劑,。我司的試劑，值得您選擇,。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來,，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定,，使試劑盒在使用前與室溫平衡,，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求,。
二,、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子,、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體,、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG,；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解,；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本,；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血,、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等,；
控制方法：采血時規(guī)范操作,，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血,；收集標本時采用無菌試管,，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久,，檢測時盡量采用新鮮標本,；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h,，待充分凝固后再離心分離血清,。

具有如下優(yōu)點：
一、高效,、靈敏,、特異的抗體；
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；
三、吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高的固相載體；
四,、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型,；
五、性價比非常好,，節(jié)省實驗經(jīng)費,。

人補體因子H相關(guān)蛋白1(FHR-1)ELISA試盒62.5-4000pg/mL舒緩激肽三鹽Bradykininacetate

SabouraudDextroseBroth玉米須（標準品）V

大鼠白細胞介素24(IL24)ELISA試盒英文名：IL24ELISAKit喹平二聚體雜質(zhì)QuetiapineDimerImpurity

二酰基甘油（Diacylglycerol）ELISA試盒0.156-10ng/mL三(羥基)氨基鹽Trisacetate

IL-10白細胞介素-10抗體規(guī)格:0.1ml叔羰基-N-beta-三基-L-天門冬酰Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine

CD123/IL3RA抗體,兔多抗,抗原親和純化ELISA   50µg鹽米諾環(huán)素,滿霉素;二四環(huán)素鹽鹽Minocyclinehydrochloride

ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細胞)球菌亞種Lactococcuslactissubsp.Lactis加蘭他敏N化物GalanthamineN-Oxide

ELISAKitforHumanIntegrinalpha-M0.312-20ng/mLBr-PreGel,4-15%TRIS-HCL,10WELLBr-PreGel,4-15%TRIS-HCL,10WELL

procollagentypeIIAⅡ型膠原α1抗體規(guī)格:0.2mlDDB1DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格:0.2ml5-羥色（5-HTP）5-Hydroxytryptophan

小鼠去素(NE)ELISA試盒英文名：NEELISAKit物質(zhì)P（2-11）/十-物質(zhì)PSubstanceP(2-11)/Deca-SubstanceP

TRAF3/CD40BP抗體,兔多抗,抗原親和純化IHC-P   50µL比阿培南Biapenem

ELISAKitforHumanMitochondrialbrownfatuncouplingprotein178-5000pg/mL正(農(nóng)殘級)n-Pentane

GLTPD2糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體規(guī)格:0.2ml水溶性四-9GLT009

小鼠小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)ELISA試盒英文名：SNRPD1ELISAKit特級新生牛血清Supernewborncalfserum
HDL elisa試劑盒CIAS1原癌基因N-Ras抗體

capsid proteinT細胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體

Cullin 5腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體

c-Kit軸突蛋白2抗體

CLIC6小球細胞粘附分子受體抗體

Cecropin B神經(jīng)生長調(diào)節(jié)蛋白1抗體

CA13軸突生長誘向因子G2抗體

CLPTM1AMACR兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫試盒

CKLFH8Annexin A1兔1,4,5-三肌(IP3)免疫試盒

CKLFH1ATG1/ULK1山羊ELISA試盒

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣,，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結(jié)合物后,，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實驗臺上,，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時,，即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。