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小鼠外周血單核細(xì)胞

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更新時間:2024-11-04 14:49:50瀏覽次數(shù):785

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7575 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠外周血單核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:肌微管素相關(guān)蛋白3抗體 膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體 結(jié)腸癌抗原16抗體 小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠肌腱成纖維細(xì)胞 bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP

詳細(xì)介紹

小鼠外周血單核細(xì)胞

小鼠外周血單核細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

巨噬細(xì)胞樣

YS-01X7575

細(xì)胞簡介:

小鼠外周血單核分離自外周血,;外周血是除骨髓之外的血液,,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,并在骨髓中發(fā)育,。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時仍然是尚未成熟的細(xì)胞,。與其他血細(xì)胞比較,單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,,并且具有更強(qiáng)的吞噬作用,。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細(xì)胞體積繼續(xù)增大,,直徑可達(dá)50-80μm,,細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細(xì)胞,。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞,,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁,、骨髓,、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒,、干擾素和白細(xì)胞介素,,參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制,還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子,。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂,,并包圍異物。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 不增殖,;不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

小鼠外周血單核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠外周血單核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

乳酸脫氫酶試劑盒   乳酸脫氫酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   乳酸脫氫酶試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:乳酸脫氫酶試劑盒,、乳酸脫氫酶試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

人組織因子途徑抑制物試劑盒   人組織因子途徑抑制物試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人組織因子途徑抑制物試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織因子途徑抑制物試劑盒,、人組織因子途徑抑制物試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

人組織因子試劑盒   人組織因子試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人組織因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人組織因子試劑盒、人組織因子試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒   人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,、人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)Elisa 試劑盒 96T/48T

Human cell division cycle gene (CDC) ELISA Kit 人細(xì)胞分裂周期基因(CDC)試劑盒

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgM,β2-GP1AbIgMELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCXC-chemokineligand16,CXCL16試劑盒人CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織ERK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

叉頭蛋白B1+B2抗體

SEDL蛋白抗體

EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

醛糖還原酶相似蛋白1(ARL1)重組蛋白 Recombinant Aldose Reductase Like Protein 1 (ARL1)

PRAP1重組人 PRAP1 / Proline-rich acidic protein 1 蛋白 Protein

IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白

NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

醛糖還原酶相似蛋白1(ARL1)重組蛋白 Recombinant Aldose Reductase Like Protein 1 (ARL1)

IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白

EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

PRAP1重組人 PRAP1 / Proline-rich acidic protein 1 蛋白 Protein

小鼠外周血單核細(xì)胞大鼠淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)試劑盒 ,英文名: Aβ1-42 ELISA Kit

Ierleukin 1 soluble receptor I (IL-1sR I) of rat ELISA Kit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sR)試劑盒

Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCyt-CELISAKit大鼠

細(xì)胞色素P450亞酶3A4(TESTOSTERONE)活性高效液相色譜法(HPLC)定量試劑盒20

RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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