操作步驟:

1）使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi),。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
4）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
7）每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8）取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果,。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值,。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),，我司嚴格按照進行,，已獲得國家承認的“三證”,，每一個產(chǎn)品都有對應的批號，只要客戶提前下單,，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,，值得您選擇,。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后,，再進行測定,，使試劑盒在使用前與室溫平衡,，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,，以滿足后面的測定需求。
二,、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子,、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體,、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG,；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解,；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本,；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血,、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規(guī)范操作,，采集的血液勿用力震蕩,，以防溶血；收集標本時采用無菌試管,，經(jīng)檢測后再低溫凍存,；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本,；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清,。

具有如下優(yōu)點：
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,；
二,、穩(wěn)定的重復性和可靠性；
三,、吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,；
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,；
五,、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費,。

α－對羥基甘氨訂購|咨詢規(guī)格：30mg乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體DGS-E1ELISAKit橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試盒

土貝母苷訂購|咨詢規(guī)格：20mgELISA試盒人TM4SF20蛋白人96T0.312-20ng/mL大鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)ELISA試盒,，英文名：ARNTLELISAKit

埃博霉素A質(zhì)量規(guī)格：國進口EpothiloneASK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

靛玉紅;Indirubin訂購|咨詢規(guī)格：20mg雌二醇抗體ACO-2ELISAKit烏頭酶2(ACO-2)ELISA試盒

冬凌草素訂購|咨詢規(guī)格：20mg類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體HSPβ8ELISAKit熱休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA試盒

3－酰基乳香訂購|咨詢規(guī)格：HPLC≥98%;20mgⅢ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體FECHELISAKit亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試盒

吡拉西坦質(zhì)量規(guī)格：>99%Piracetam人肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

苷訂購|咨詢規(guī)格：HPLC≥98%;20mg化肌醇聚鹽酶樣蛋白1抗體CAP2ELISAKit胞漿抗蛋白水解酶2(CAP2)ELISA試盒

羥唑啉訂購|咨詢規(guī)格：50mgC2CD3蛋白抗體MBP/MBLELISAKit甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試盒

常春藤皂苷元訂購|咨詢規(guī)格：HPLC≥98%;20mg毛細管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體FⅧAgELISAKit第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試盒

DL-交酯(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)DL-Lactide桔橙小單孢菌Micromonosporaaurantiaca

Benzoicacid保存：-20℃規(guī)格：50mg視黃醇脫酶11/型肝炎病毒核心蛋白抗體

血竭素高鹽;Dracohodinp規(guī)格：20mg訂購|咨詢HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細胞)5×106cells/瓶×2

D-阿拉伯糖醇;Adonito訂購|咨詢規(guī)格：20mg神經(jīng)型一化合成酶結(jié)合蛋白抗體anti-BP180-AbELISAKit人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)ELISA試盒
ICD elisa試劑盒CEP164C11orf74人激素敏感性脂肪酶(HSL)免疫試盒

CEP170C12ORF4人激動異構(gòu)酶/細胞分裂素MB(CKMB)免疫試盒

CDX4C12ORF24人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)免疫試盒

CUTCCNGB1人基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF1A)免疫試盒

CUTL1CD153人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)免疫試盒

CTNSCytokeratin 10+14+17+19+42人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)免疫試盒

CTRB1CK10/Cytokeratin 10人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)免疫試盒 VATSLC4A4脂肪細胞型脂肪結(jié)合蛋白

VCPSFTPD脂肪酰輔酶A還原酶2抗體

VDACSpectrin alpha chain, erythrocytic 1脆性X相關(guān)蛋白樣2抗體

phospho-VEGFR2(Tyr951)SNX5脂肪酰胺水解酶2抗體

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣,，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結(jié)合物后,，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實驗臺上,，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時,，即可終止酶反應,。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。