詳細介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,,即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
產(chǎn)品名稱 | MIP-5 elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat macrophage inflammatory protein 5, MIP-5 Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進行,,已獲得國家承認的“三證”,,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求,。
二,、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體、某些自身抗體等,;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG,;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解,;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血,、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等,;
控制方法:采血時規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血,;收集標(biāo)本時采用無菌試管,,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本,;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,,待充分凝固后再離心分離血清,。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
具有如下優(yōu)點:
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費,。
LTB(heat-labileenterotoxinBsubunit)ELISAKit人不耐熱腸毒素B亞單位CAS:進口,、國產(chǎn)規(guī)格:50mg
CT(Chlamydiatrachomatis)ELISAKit人沙眼衣原體抗體CAS:158830進口、國產(chǎn)規(guī)格:50mg
ANGELISAKit大鼠血管生長素CAS:531521進口,、國產(chǎn)規(guī)格:50mg
schistosomaELISAKit人血吸CAS:4570713進口,、國產(chǎn)規(guī)格:25mg
sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體CAS:333968進口、國產(chǎn)規(guī)格:200mg
RVAg(Rotavirusantigen)ELISAKit人輪狀病毒抗原CAS:1250進口,、國產(chǎn)規(guī)格:200mg
KAF/ARELISAKit大鼠角細胞內(nèi)分泌子/雙調(diào)蛋白CAS:776進口,、國產(chǎn)規(guī)格:200mg
cAMPELISAKit大鼠環(huán)腺苷CAS:945進口、國產(chǎn)規(guī)格:200mg
LPAg(Legionellapneumophilaantigen)ELISAKit人軍團菌抗原CAS:716進口,、國產(chǎn)規(guī)格:1.2ml×3ampules
ALCAMELISAKit大鼠白細胞活黏附子CAS:782進口,、國產(chǎn)規(guī)格:1.2ml×3ampules
colicinELISAKit人大腸CAS:587869進口、國產(chǎn)規(guī)格:500mg
ILELISAKit大鼠白介素9CAS:1236進口,、國產(chǎn)規(guī)格:1.2ml×3ampules
ADV-Ag(AdenovirusAntigen)ELISAKit人腺病毒抗原CAS:1287進口,、國產(chǎn)規(guī)格:500mg
MIFELISAKit大鼠巨噬細胞移動抑制子CAS:882進口、國產(chǎn)規(guī)格:200mg
TrichinellaantibodyELISAKit人旋抗體CAS:1210進口,、國產(chǎn)規(guī)格:200mg
MIP-5 elisa試劑盒7-代-beta-谷甾Amplite™ Calcium Quantitation Kit *Red Fluorescence*TP游離脂肪檢測試盒
7-代扁柏脂素Amplite™ Ethanol Quantitation KitMT總蛋白檢測試盒
7--5,7-二羥基雙黃酮酯Amplite™ Glucose Quantitation KitE2褪黑素檢測試盒
7-異戊基-gamma-花椒Rat Activin A,ACV-A ELISA Kit5-HT雌二檢測試盒
8(14),15-異海松二-3,18-二Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA KitIgA5羥色胺檢測試盒
8-羥基-4-蓽澄茄-3-酮Rat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA KitIgG免疫球蛋白A檢測試盒