操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí),。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8）取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9）在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

試劑和樣本的控制方法：
一,、試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,，值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來,，在室溫下放置20-30 min后,，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡,，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求,。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG,；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí),，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解,；
補(bǔ)體的控制方法：
①用EDTA稀釋標(biāo)本,；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血,、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長(zhǎng)或凝固不全等,；
控制方法：采血時(shí)規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩,，以防溶血,；收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管,，經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存；保存時(shí)間不宜過久,，檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本；對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,，并放入37℃水中1 h,，待充分凝固后再離心分離血清,。

具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效,、靈敏、特異的抗體,；
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三,、吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高的固相載體,；
四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,；
五、性價(jià)比非常好,，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

PTK/CD115(proteintyrosinekinase)ELISAKit人蛋白酪氨激酶CAS:1147進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：250mg

PTP/PTPase/CD148(proteintyrosinephosphatase)ELISAKit人蛋白酪氨酶CAS:5275進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：100mg

TACE(TNFAlphaconvertingenzyme)ELISAKit人腫瘤壞死子α轉(zhuǎn)酶CAS:16752進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：50mg

PMNElastase(PolymorphonuclearElastase)ELISAKit人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶CAS:9922進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：50mg

uPA/PLAU(urokinase-typeplasminogenactivator)ELISAKit人尿激酶型纖溶酶原激活物CAS:35212進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：200mg

KLK8(urokinase-typeplasminogenactivator)ELISAKit人激肽釋放酶8CAS:12642進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：200mg

KLK6(Kallikrein6)ELISAKit人激肽釋放酶6CAS:230673進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：200mg

FDA(Fructose,6-bisphosphatealdolase)ELISAKit人糖1,6二縮酶CAS:38479進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：200mg

cath-D(cathepsinD)ELISAKit人組織蛋白酶DCAS:6432進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：200mg

HSL(hormonesensitivelipase)ELISAKit人激素敏感性脂肪酶CAS:497460進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：100mg

PK(pancreatickininogenase)ELISAKit人胰激肽原酶CAS:110723進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：350mg

ACO(aconitase2)ELISAKit人烏頭酶2CAS:2198618進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：200mg

26SPSM(26Sproteasome)ELISAKit人26S蛋白酶體CAS:1281733進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：10mg

CDK(Cyclin-dependentkinase4)ELISAKit人周期素依賴性激酶4CAS:2170879進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：10mg

PLAP(Placentalalkalinepkosphatase)ELISAKit人胎盤性酶CAS:508進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)規(guī)格：500mg
HGF elisa試劑盒6Shogaol6姜555668

FAST BLUE B SALT FOR MICROSCOPY固藍(lán)B14263946

NA水質(zhì)鐵與錳混合標(biāo)樣

Lead dinitrate鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液10099748

2Chloro6fluorobenzyl chloride26芐55117152

Helicid豆腐苷80154343

1(5Bromo2methoxyphenyl)adamantane2(1金剛)4溴104224637

POLYETHYLENE GLYCOL MONOOLEYL ETHER聚20油9004982

3Bromo2chlorothiophene23溴40032733

BASF PALAMOLL 646聚二1,4二150923129

Chondroitin sulfate軟骨素9007287

Methyl 2(methylamino)benzoate鄰氨85916

Cyclopropyl acetylene環(huán)炔6746947

Lanolin羊脂8006540

Soyasaponin Aa大豆皂苷AA117230338

姜 122485 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,；20mg/vial

異甘草素 961295 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,，20mg/vial

京平甙 24512638 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

黃蓮素 2086831 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,，20mg/vial

槐定 6882684 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial

川續(xù)斷皂苷 33289859 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,，20mg/vial

鬼臼素 518285 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

胡黃連苷Ⅰ 27409309 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

甘草苷 551155 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

異綠原B 14534613 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

黃芪苷 84687434 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

辣椒素 2444464 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

藁本內(nèi) 4431010 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

艾葉對(duì)照藥材  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 1g

酰新原 63238675 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋,，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,，以便 不時(shí)觀察,，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),，即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板 
1.陰性對(duì)照顏色極淺,，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。