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產品名稱：小鼠外周血中性粒細胞

組織來源：外周血

產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖,；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細胞簡介：

小鼠外周血中性粒分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。白細胞是一類無色、球形,、有核的血細胞,。白細胞不是一個均一的細胞群,，根據其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類：粒細胞,、單核細胞和淋巴細胞,，其中粒細胞又可根據胞質中顆粒的染色性質不同，分為中性粒細胞,、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種,。中性粒細胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質呈無色或極淺的淡紅色,，有許多彌散分布的細小的（0.2～0.4微米）淺紅或淺紫色的顆粒,。細胞核呈桿狀或2～5分葉狀，葉與葉間有細絲相連,。中性粒細胞具趨化作用,、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓,，具有分葉形或桿狀的核,，胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體,，內含髓過氧化酶,、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,，與細胞的吞噬和消化功能有關,。中性粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用，它處于機體抵御微生物病原體,，特別是在化膿性細菌入侵的線,，具有很強的吞噬活性，可吞噬細菌,、衰老的紅細胞,、抗原一抗體復合物和壞死的細胞等,。中性粒細胞內含有大量溶酶體酶,，因此能將吞噬入細胞內的細菌和組織碎片分解。當中性粒細胞吞噬數十個細菌后,，自身發(fā)生解體,，所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細胞是人體內壽命最短的細胞,，一般體外培養(yǎng)12-24h內活性穩(wěn)定,，48h活性下降，96h基本死亡,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠外周血中性粒采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠外周血中性粒經瑞氏染色法,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產品：

血管內皮抑素 (Endostatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

內皮素 -1(Endothelin-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

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小鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai histone aibody of ai -DNA (H2A-H2B) / two mer -DNA aibody ELISA Kit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體試劑盒

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1號染色體開放閱讀框55抗體

TIP41樣蛋白抗體

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原

LRP1重組人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein

CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白

ALPL Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白

PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原

CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

ALPL Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白

LRP1重組人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein

小鼠外周血中性粒細胞大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒 ,，英文名： HIF-1α ELISA Kit

Porcine plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒

廣州管圓線蟲核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLRP-6(Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein)ELISAKit人低密度脂蛋白受體相關蛋白6

通用HRP酶聯檢測封閉溶液100毫升

ELISAKitsICAM-1雞可溶性細胞間粘附分子1

收到細胞如何處理,？

1、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,。若有,，請拍照，并及時與技術支持聯系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）,。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作