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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠外周血中性粒細(xì)胞
組織來源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖,;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠外周血中性粒分離自外周血,;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。白細(xì)胞是一類無(wú)色,、球形、有核的血細(xì)胞,。白細(xì)胞不是一個(gè)均一的細(xì)胞群,,根據(jù)其形態(tài),、功能和來源部位可以分為三大類:粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,,其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,,分為中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種,。中性粒細(xì)胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,,胞質(zhì)呈無(wú)色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細(xì)小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒,。細(xì)胞核呈桿狀或2~5分葉狀,,葉與葉間有細(xì)絲相連。中性粒細(xì)胞具趨化作用,、吞噬作用和殺菌作用,。中性粒細(xì)胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,,胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒,。這些顆粒多是溶酶體,內(nèi)含髓過氧化酶,、,、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān),。中性粒細(xì)胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,,它處于機(jī)體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細(xì)菌入侵的線,,具有很強(qiáng)的吞噬活性,,可吞噬細(xì)菌、衰老的紅細(xì)胞,、抗原一抗體復(fù)合物和壞死的細(xì)胞等。中性粒細(xì)胞內(nèi)含有大量溶酶體酶,,因此能將吞噬入細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌和組織碎片分解,。當(dāng)中性粒細(xì)胞吞噬數(shù)十個(gè)細(xì)菌后,自身發(fā)生解體,,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液,。中性粒細(xì)胞是人體內(nèi)壽命最短的細(xì)胞,一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定,,48h活性下降,,96h基本死亡。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血中性粒采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血中性粒經(jīng)瑞氏染色法,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管內(nèi)皮抑素 (Endostatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
內(nèi)皮素 -1(Endothelin-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
內(nèi)啡肽 - b (Endorphin- b ) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai histone aibody of ai -DNA (H2A-H2B) / two mer -DNA aibody ELISA Kit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體試劑盒
Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 人上皮特異性抗原(ESA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor8-iso-PG(Human8-isoprostaglandin)ELISAKit人8異前列腺素
異丁甲基細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量試劑盒20次
MouseMotilin,MTLELISAKit小鼠胃動(dòng)素(MTL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
1號(hào)染色體開放閱讀框55抗體
TIP41樣蛋白抗體
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原
LRP1重組人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
ALPL Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白
PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
ALPL Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白
LRP1重組人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein
小鼠外周血中性粒細(xì)胞大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒 ,英文名: HIF-1α ELISA Kit
Porcine plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒
廣州管圓線蟲核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLRP-6(Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein)ELISAKit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6
通用HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液100毫升
ELISAKitsICAM-1雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作