詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞
組織來源:胃組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠胃黏膜上皮分離自胃黏膜組織,;胃黏膜柔軟,,活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞,,充盈時變平坦,。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞,突向腔內(nèi)稱幽門瓣,。胃黏膜可分為三層,,即上皮層(單層柱狀上皮)、固有層(由結(jié)締組織構(gòu)成,、含有大量的胃腺)和黏膜肌層(為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱),。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層,,細(xì)胞為單層柱狀上皮,排列整齊,,能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面,,防止胃酸和對胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子,、藥物,、激素對細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡單而的模型,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠胃黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(mouse VEGF-B) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(mouse VEGF-C) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(mouse VEGF-D) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 96T/48T
Human leucine aminopepridase (LAP) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒
Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 人脂0壁酸(LTA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenfactorB,BF試劑盒雞B因子(BF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11抗體
Tyrosine Hydroxylase
MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein
E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白
LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein
CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白
CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein
IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein
小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒 ,,英文名: LDL-IC ELISA Kit
Pig hea muscle oponin I (cTn- I) ELISA Kit 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒
鉤端核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLR/Ob-R(HumanLeptieceptor)ELISAKIT人苗條素受體
通用封阻緩沖液100毫升
ELISAKitAT-Ⅲ雞抗Ⅲ抗體