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小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-05 16:56:45瀏覽次數(shù):680

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號 YS-01X8496 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:整合素結(jié)合性信號分子抗體 人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 LSM5蛋白抗體 小鼠腦微血管周細(xì)胞 苯甲酸肽水解酶β抗體 人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞 腦蛋白9抗體 小鼠正常肝細(xì)胞,;NCTCclone1469

詳細(xì)介紹

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

腹膜

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細(xì)胞樣

YS-01X8496

細(xì)胞簡介:

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮分離自腹膜組織,;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞和間質(zhì)(結(jié)締組織,、纖維,、毛細(xì)血管、淋巴管)構(gòu)成,,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,,減輕臟器間的摩擦,。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連,;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果,。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜,,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,,薄而光滑,呈半透明狀,。襯于腹,、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹,、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟,、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時(shí)可減少摩擦,。腹膜的主要生理功能:①分泌功能,;②吸收功能;③再生能力,;④防御功能,;⑤調(diào)理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細(xì)血管,,毛細(xì)血管上有不同的孔徑,;腹膜的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后靜脈是進(jìn)行溶質(zhì)交換的主要場所。

方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合化學(xué)試劑抑制法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL0.1mg/ml),,明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%CO2,,5%

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

載脂蛋白D   英文名稱:   Human Apolipoprotein D   英文縮寫:   ApoD

載脂蛋白M   英文名稱:   Human Apolipoprotein M   英文縮寫:   ApoM

Human Aquaporin 1   英文名稱:   Human Aquaporin 1   英文縮寫:   AQP-1

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白   英文名稱:   Human Asporin1   英文縮寫:   ASPN1

PAN3蛋白抗體

G蛋白結(jié)合蛋白RAB10抗體

BMPR1A重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mgChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原

ATF2重組人 ATF2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ACLY Protein Human 重組人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽)僀?僀

ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mgChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原

ACLY Protein Human 重組人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BMPR1A重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

PLAUR Protein Mouse 重組小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

ATF2重組人 ATF2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 試劑盒

Human ai actin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗肌動蛋白抗體(AAA)試劑盒

swinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/SLAELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC/SLA)試劑盒分裝

ADVIgMIII腺病毒IgMⅢ型(間接法二步法)

血液合成酶總活性比色法定量試劑盒20

Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)試劑盒 ,英文名: SFRP5 ELISA Kit

Rat beta hydroxybyric acid (beta OHB) ELISA Kit 大鼠β羥(βOHB)試劑盒

RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒分裝

CLIAKitforDPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氫酶樣2

細(xì)胞葡萄糖-6-0酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量試劑盒50

Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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