詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腹膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8496 |
細(xì)胞簡介:
小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮分離自腹膜組織,;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,,主要由間皮細(xì)胞和間質(zhì)(結(jié)締組織,、纖維,、毛細(xì)血管,、淋巴管)構(gòu)成,,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,,能分泌黏液潤濕臟器的表面,,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連,;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大,、配布復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,,薄而光滑,,呈半透明狀。襯于腹,、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層,;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟,、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦,。腹膜的主要生理功能:①分泌功能,;②吸收功能;③再生能力,;④防御功能,;⑤調(diào)理功能。臟,、壁腹膜都有豐富的毛細(xì)血管,,毛細(xì)血管上有不同的孔徑;腹膜的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后靜脈是進(jìn)行溶質(zhì)交換的主要場所,。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合化學(xué)試劑抑制法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
載脂蛋白D 英文名稱: Human Apolipoprotein D 英文縮寫: ApoD
載脂蛋白M 英文名稱: Human Apolipoprotein M 英文縮寫: ApoM
Human Aquaporin 1 英文名稱: Human Aquaporin 1 英文縮寫: AQP-1
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白 英文名稱: Human Asporin1 英文縮寫: ASPN1
PAN3蛋白抗體
G蛋白結(jié)合蛋白RAB10抗體
BMPR1A重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mgChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原
ATF2重組人 ATF2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ACLY Protein Human 重組人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽)僀?僀
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mgChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原
ACLY Protein Human 重組人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BMPR1A重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
PLAUR Protein Mouse 重組小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
ATF2重組人 ATF2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 試劑盒
Human ai actin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗肌動蛋白抗體(AAA)試劑盒
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)試劑盒分裝
ADVIgMIII腺病毒IgMⅢ型(間接法二步法)
血液合成酶總活性比色法定量試劑盒20次
Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒
小鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)試劑盒 ,,英文名: SFRP5 ELISA Kit
Rat beta hydroxybyric acid (beta OHB) ELISA Kit 大鼠β羥(βOHB)試劑盒
RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒分裝
CLIAKitforDPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氫酶樣2
細(xì)胞葡萄糖-6-0酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量試劑盒50次
Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行