小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品：大鼠肌源性干細胞 SW954人外陰鱗癌細胞 肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體 AM (人腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移)) 張力蛋白4重組兔單克隆抗體 A-253人頭頸部鱗狀細胞癌細胞 Rab4相互作用蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體34抗體

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產(chǎn)品名稱：小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

組織來源：骨髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細胞形態(tài)：圓形,、梭形,、多角形，形態(tài)多樣

傳代特性：屬于高度分化細胞,；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

小鼠骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

細胞簡介：

小鼠骨髓樹突狀分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌,、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多,，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的,；樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,，在GM-CSF,、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態(tài)不規(guī)則,，表面皺褶多,，亦可見少量短刺狀突,，胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導成的單核細胞,，貼壁形態(tài)多樣,。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導而成,，多數(shù)呈懸浮生長,， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大,，表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導致自發(fā)分化成熟,。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,，主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志,、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定,。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,，進而激活T淋巴細胞,，誘導免疫應答，處于啟動,、調(diào)控,、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié),；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化,、增殖產(chǎn)生免疫應答,，不能激活T細胞的第二信號，可導致T細胞無能,，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受,。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86,、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,，一般在30%以下。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞,、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的小鼠骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定,，純度可達80%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）,、對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細胞如何處理？

1,、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

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人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒   人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒      人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒,，，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒,、人主要組織相容性復合體Ⅰ類 試劑盒

人軸突生長誘向因子4試劑盒   人軸突生長誘向因子4試劑盒      人軸突生長誘向因子4試劑盒，,，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：人軸突生長誘向因子4試劑盒、人軸突生長誘向因子4 試劑盒

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ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (Hi僀?僀

CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白

SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein

ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標簽)

RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein

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飲料乙比色法定量試劑盒20次

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