詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
關節(jié)囊 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8500 |
細胞簡介:
小鼠關節(jié)囊成纖維分離自關節(jié)囊組織,;關節(jié)囊(articular capsule)是由結締組織構成的膜囊,附著于關節(jié)的周圍,,密封關節(jié)腔,。關節(jié)囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內(nèi)層為滑膜層,。纖維層實際上是一個連結骨的骨膜向另一骨骨膜的移行,。纖維層厚而堅韌,,由致密結締組織構成,含有豐富的血管和神經(jīng),。其淺層纖維多呈縱行排列,;深層纖維主要為環(huán)行纖維。纖維層的厚薄,,各個關節(jié)不相同,,即是在同一關節(jié)中,各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關節(jié)中,,都較厚而緊張,,相反,于運動靈活的關節(jié),,則較薄而松弛,。有的關節(jié)囊的部分纖維囊缺如,僅一層滑膜層,;有的部分明顯增厚,,形成韌帶?;颖《釢?,是由疏松結締組織構成,襯在纖維層內(nèi)面,,周緣附著在關節(jié)軟骨的邊緣,。它朝向關節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮,此面上蓋有一層內(nèi)皮細胞,?;は蜿P節(jié)腔分泌滑液,滑液是稍粘稠而透明的液體,,可減少關節(jié)中相連骨的摩擦,,是一種滑潤劑?;け砻婵尚纬山q毛或皺襞突入關節(jié)腔內(nèi),。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,形成滑膜囊,,常位于肌腱與骨面之間,。有時滑膜層突出不明顯,僅呈深窩狀,,稱為囊狀隱窩,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠關節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠關節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,,含FBS、bFGF,、Insulin,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳1-2代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
小鼠關節(jié)囊成纖維體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài):
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
(NO)測定試劑盒(還原酶法)
超氧化物歧化酶(SOD)分型測試盒(羥胺法)
微量二(MDA)測定試劑盒(TBA法)
—S轉移酶(GSH-ST)試劑盒(比色法)
Dysferlin蛋白抗體
視網(wǎng)膜母細胞瘤結合蛋白6抗體
SFRP2重組小鼠 sFRP2 蛋白 Protein
C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1 0.5mgC-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)
APEX1重組人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 Protein
CAMK1G Protein Human 重組人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His僀?僀
C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1 0.5mgC-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)
CAMK1G Protein Human 重組人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 標簽)
SFRP2重組小鼠 sFRP2 蛋白 Protein
MCPT1 Protein Mouse 重組小鼠 MCPT1 蛋白
APEX1重組人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 Protein
鴨胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA pcr檢測試劑盒
Human ai hCG aibody (AhCGAb) ELISA Kit 人抗人絨毛膜抗體(AhCGAb)試劑盒
HumanMotilin,MTLELISAKit 人胃動素(MTL)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforAcSDKPELISAKit大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯
血影細胞膜熒光染色試劑盒20次
Mouseplateletfactor3,PF3ELISAKit小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠關節(jié)囊成纖維細胞大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)試劑盒 ,英文名: Tn-T ELISA Kit
Rabbit Bcl-2 associated X protein (BAX) ELISA Kit 兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)試劑盒
牛(BCV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMouseSlit2ELISAKit小鼠Slit2
體液鈣離子濃度比色法定量試劑盒20次
ELISAKit6-K-PG人6同前列腺素
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行